Desarrollo de un método por HPLC para determinar concentraciones de closantel en plasma ovino

FARIAS, C.; IMPERIALE, F.; IEZZI, S.; SALLOVITZ, J.; LANUSSE, C.

Mar del Plata

Congreso; XLII Reunión anual de la Asociación Argentina de Farmacología Experimental; 2010

Soc. Argentina de Farmacología Experimental

Debido al desarrollo de resistencia a la mayoría de los fármacos antiparasitarios de uso convencional por parte de los principales géneros parasitarios que afectan a ovinos, closantel (CLS) (derivado de las salicilanilidas) se presenta actualmente como una alternativa para el tratamiento de parasitosis internas y algunas ectoparasitosis que afectan a ovinos. A pesar del uso ampliamente difundido de este compuesto, no existe información disponible sobre las características de su distribución sistémica. Por lo tanto, para cuantificar las concentraciones de CLS en plasma ovino fue necesario el desarrollo y validación de un método analítico por HPLC con detección por fluorescencia. La validación fue basada en la linealidad, porcentaje de recuperación absoluta, exactitud, precisión en los diferentes días de trabajo y límite de cuantificación. La extracción de CLS desde muestras de plasma ovino adicionadas fue realizada empleando una doble extracción liquido-liquida, seguida de una extracción en fase sólida (cartuchos de C18). El procedimiento analítico-metodológico empleado resultó altamente eficiente. La identificación de CLS y CLS demetilado como estándar interno se realizó comparando los tiempos de retención de estándares de optima pureza en la corrida cromatográfica. El análisis de regresión fue lineal y los valores de los coeficientes de correlación obtenidos en las rectas de calibración (rango de 0.1-5 µg/ml y 5-80 µg/ml) construidas por el método de regresión lineal fueron superiores a r=0.99. El promedio de los porcentajes de recuperación absoluta fue 94% y una precisión inter-día del 8.6% (CV). La exactitud de los procedimientos analíticos mostraron un CV ≤6%. El método analítico desarrollado permitió cuantificar concentraciones de CLS en plasma ovino por encima de 0.1 µg/ml. Los resultados obtenidos en la validación aseguran que el método de extracción y cuantificación por HPLC es analíticamente adecuado para cuantificar concentraciones de CLS en plasma ovino.