Estudio del comportamiento de células estromales mesenquimales en el microambiente de las metástasis hepáticas de cáncer de colon experimental

GOMEZ BUSTILLO, S; FIORE, EJ; RODRIGUEZ, M; PEIXOTO, E; ATORRASAGASTI, C; MALVICINI, M; MAZZOLINI, GD; GARCIA, MG

Congreso; XVIII Congreso Argentino de Hepatología; 2015

Introducción: El carcinoma colorectal (CRC) es la tercer causa más frecuente de cáncer y lasmetástasis hepáticas están presentes en cerca del 15-25% de los pacientes al momento deldiagnóstico. El único tratamiento con intención curativa es la cirugía, que puede aplicarsea una minoría de pacientes. En la búsqueda de nuevas opciones terapéuticas surge la terapiagénica y celular. Las células estromales mesenquimales adultas (MSCs) son capaces de migrarhacia el ambiente tumoral en respuesta a factores producidos por el tumor, convirtiéndolas enuna herramienta muy valiosa para el transporte de genes terapéuticos. Existen evidencias queindican que el comportamiento y funcionalidad de las MSCs dependerá del microambientedonde se encuentren. Objetivo: el objetivo de este trabajo es evaluar el efecto del microambientetumoral (modelo de metástasis hepáticas de cáncer de colon) sobre las MSCs, estudiandoun ambiente considerado inmunosupresor y otro que demostramos previamente que favorecela respuesta antitumoral, generado por el tratamiento combinado de ciclofosfamida (Cy) y unadenovirus que expresa la citoquina inmunoestimuladora IL-12 (IL-12). Materiales y métodos:se inocularon células de adenocarcinoma de colon murino CT26 (5 x105/animal) por vía intrahepáticaen ratones macho adultos Balb/c (día 0). Los animales se distribuyeron en 2 grupos(n=8/grupo): grupo tratado con Cy (dosis única de 50 mg/Kg, i.p/día 7) más AdIL-12 (dosisúnica, 109 PFU, i.v/24hs post-Cy) y grupo control que no recibió el tratamiento. Se sacrificaronlos animales 7 días después del tratamiento (día 14) y se tomaron muestras del tumor. Sedividió el tumor en fragmentos para aislar mRNA y evaluar la expresión de genes por qPCRy para generar medios condicionados (MC), incubando pequeños fragmentos de este tumoren medio de cultivo durante 24 horas. Los MC fueron utilizados para evaluar la migración invitro sobre las MSCs de ratón y para estimular a las MSCs y luego evaluar la expresión de genespor qPCR en las MSCs. Resultados: Se observó que ambos MC fueron capaces de inducir lamigración in vitro de las MSCs. La evaluación de los genes expresados en el tumor indicó queel microambiente tumoral proveniente de los tumores tratados (TT) presentó menores nivelesde VEGF, IL-6 y HIF-1 y mayores niveles IP-10 que los tumores control (TC), indicando queambos microambientes tumorales presentaron diferentes características de expresión génica.Por otro lado, la incubación con el MC de los TT indujo la expresión de IL-8 e IP-10 ydisminuyó la expresión de IL-6 en las MSCs en comparación con los MC de los TC, corroborandola hipótesis que el microambiente tumoral puede condicionar el comportamiento de lasMSCs. Conclusiones: Los factores producidos por el medio condicionado del TT indujo unfenotipo sobre las MSCs que condicionaria una mejor respuesta antitumoral. Estos resultadosnos permitirán seguir estudiando a las MSCs como posibles co-adyuvantes del tratamiento,especialmente en combinación con la Cy e IL-12.