? Detección de virus en apiarios ubicados en regiones de clima frío dentro de la provincia de Neuquén, Argentina

FERNANDA GONZALEZ; BRAVO M; FERRUFINO CECILIA; GROSSICH ROMINA; GARCIA NANCY; MARIA JOSE DUS SANTOS

Congreso; XXIII reunión científico técnica de la AAVLD; 2021

INTRODUCCIÓNEntre los patógenos que afectan a las abejas, los virus junto con el ectoparásito Varroa destructor cumplen un rol importante frente a la perdida de colmenas. Resultados previos en eco-regiones de clima templado y subtropical de Argentina, mostraron la presencia de: Virus de las alas deformadas (DWV), Virus de la parálisis aguda (ABPV), Virus de las celdas reales negras (BQCV), Virus de la parálisis crónica (CBPV) y Virus de la cría ensacada (SBV)1, 2, 3,. Sin embargo, poco se sabe sobre la presencia de virus en regiones de clima frío.El objetivo de este trabajo fue evaluar la presencia de virus que afectan a la abeja melífera en eco-regiones de clima frío de Argentina.MATERIALES Y MÉTODOSSe realizó un muestreo en la provincia de Neuquén durante el mes de noviembre del 2019, en el cual se tomaron muestras en 4 apiarios de la localidad de Aluminé, 3 de San Martin de los Andes y 1 de Quilla. Se analizaron 6 colmenas por apiario y de cada una se procesó un grupo de 30 abejas nodrizas. Para la extracción del ARN viral se utilizó un kit comercial, siguiendo las instrucciones del fabricante. ApiarioBQCVDWVCBPVSBVABPVKBVIAPV1POSPOSPOSNDNDNDND2POSNDPOSPOSNDNDND3POSPOSNDNDNDNDND4POSPOSNDPOSPOSNDND5POSNDNDNDNDNDND6POSNDNDPOSNDNDND7NDNDNDNDNDNDND8POSNDNDNDNDNDNDLa detección del genoma viral se realizó mediante una RT-qPCR utilizando cebadores específicos previamente descriptos por Locke et at 20124 y Bradford et al. 20175, que permitieron la detección del DWV, CBPV, ABPV, SBV, KBV, IAPV y BQCV. Asimismo, en cada colmena se determinó el porcentaje de varroa forética (método del frasco).RESULTADOSSe observó un 61% de muestras positivas para BQCV, 5,5% para DWV, CBPV y SBV, y 2% para ABPV. No se detectó la presencia de IAPV y KBV y tampoco del ácaro varroa. En el 87,5% de los apiarios muestreados se determinó la presencia de al menos uno de los virus. En el 5,5% de las muestras se detectó coinfección entre dos virus (BQCV y DWV o SBV o CBPV) y el 2% presentó coinfección con tres virus (DWV, ABPV y BQCV). A partir de muestras de los apiarios en los que se detectó BQCV, se amplificó y secuenció un fragmento de 700 pb correspondiente a la poliproteína de la cápside viral. Las secuencias obtenidas se utilizaron para realizar análisis filogenéticos.Tabla 1: Detección de virus por apiarioDISCUSIÓN Y CONCLUSIONESEste es el primer monitoreo de agentes virales realizado en colmenas de clima frío. Estos datos son relevantes para conocer la circulación viral en las diferentes regiones del país y así poder implementar metodologías de control.BIBLIOGRAFÍA1: Varroa destructor and viruses association in honey bee colonies under different climatic conditions. Giacobino A, Molineri AI, Pacini A, Fondevila N, Pietronave H, Rodríguez G, Palacio A, Bulacio Cagnolo N, Orellano E, Salto CE, Signorini ML, Merke J. Environ Microbiol Rep. 2016 Jun;8(3):407-12. doi: 10.1111/1758-2229.12410.2: Prevalence of honey bee (Apis mellifera) viruses in temperate and subtropical regions from Argentina. Molineri AI, Pacini A, Giacobino A, Bulacio-Cagnolo N, Aignasse A, Zago L, Fondevila N, Ferrufino C, Merke J, Orellano E, Bertozzi E, Pietronave H, Signorini ML. Rev Argent Microbiol. 2017 Apr - Jun; 49(2):166-173. doi: 10.1016/j.ram.2016.12.004.3: Risk factors for the presence of Deformed wing virus and Acute bee paralysis virus under temperate and subtropical climate in Argentinian bee colonies. Molineri A, Giacobino A, Pacini A, Bulacio Cagnolo N, Fondevila N, Ferrufino C, Merke J, Orellano E, Bertozzi E, Masciángelo G, Pietronave H, Signorini M. Prev Vet Med. 2017 May 1;140:106-115. doi: 10.1016/j.prevetmed.2017.02.019.4: Acaricide treatment affects viral dynamics in Varroa destructor-infested honey bee colonies via both host physiology and mite control. Locke, B., Forsgren, E., Fries, I. & de Miranda, J. R. 2012. Appl Environ Microbiol, 78, 227-35.5: A real-time PCR method for quantification of the total and major variant strains of the deformed wing virus. Bradford, E.L., Christie, C.R., Campbell, E.M., Bowman, A.S., 2017. PloS one 12, e0190017.