DETECCIÓN DE PESTIVIRUS A PARTIR DE LOTES DE SUERO FETAL BOVINO NACIONAL

PECORA, ANDREA; PEREZ AGUIRREBURUALDE MARIA SOL; ZABAL O; DUS SANTOS, MARÍA JOSE

Congreso; Congreso internacional de la Sociedad Argentina de Virología, CABA, 2017.; 2017

El suero bovino fetal (SFB) es utilizado ampliamente como suplemento del crecimiento en los medios de cultivos celulares y como componente de numerosos biológicos utilizados en la salud animal y humana. Los virus tipo HoBi son un grupo de pestivirus emergentes que afectan a bovinos, bubalinos y caprinos. Desde su primera identificación en SFB en Brasil en el año 2004, se ha reportado su presencia en otros países europeos y asiáticos. Actualmente, se sabe que los pestivirus HoBi generan en los rodeos enfermedad respiratoria, fallas reproductivas y animales persistentemente infectados.El objetivo de este trabajo fue determinar de manera indirecta cuáles tipos de VDVB prevalecen en nuestro país, a través del análisis de lotes nacionales de SFB. Asimismo, a partir de estas muestras se realizaron ensayos específicos para la detección del virus HoBi, con el fin de investigar si este agente circula en el ganado bovino local.En este trabajo, se obtuvieron 112 muestras semielaboradas de SFB previas a la etapa de irradiación, pertenecientes a un laboratorio nacional que comercializa hemoderivados y que trabaja con frigoríficos ubicados en Buenos Aires. Las muestras fueron sometidas a extracción de ARN, seguido de la reacción de retrotranscriptasa reversa y reacción en cadena de la polimerasa (RT-PCR) que amplifican un fragmento de los pestivirus (5´UTR). Para ello, se realizaron 2 PCR, una que utiliza los cebadores para pestivirus 324-326 y otra que utiliza los cebadores N2-R5, que detectan específicamente a los virus HoBi. En las muestras positivas, se secuenciaron los segmentos 5´UTR de los virus. Con las muestras positivas para VDVB y virus HoBi se realizó un estudio de filogenia utilizando el método Kimura y Neighbour Joining.Pudimos observar que al realizar la RT-PCR con los cebadores 324-326, fue posible detectar material genético del VDVB en el 33,3% de las muestras de SFB. De esas muestras (n=42), 34 fueron clasificadas como VDVB-1b, 6 como VDVB-1a y 2 como VDVB-2. Ninguna secuencia obtenida fue compatible con virus HoBi. Sin embargo, al realizar la RT-PCR con los cebadores N2-R5, fue posible obtener material genético de virus HoBi en 4 muestras, que habían sido negativas para los cebadores 324-326. Los cebadores N2-R5 no amplificaron ninguna de las muestras positivas para VDVB.El alto porcentaje de cepas VDVB-1b encontrado en este trabajo está en concordancia con datos previos, que demostraban la alta frecuencia del genotipo 1b del VDVB en Argentina a partir de muestras clínicas. Por otro lado, encontramos material genético del virus HoBi a partir de los SFB, que hasta el momento no había sido detectado en nuestro país. En este aspecto, los trabajos a futuro estarán apuntados a aislar y caracterizar este agente. Por último, queremos destacar la importancia de que el SFB se comercialice irradiado, para evitar contaminaciones con pestivirus.