ALTA MORBILIDAD Y MORTALIDAD OCASIONADA POR EL VIRUS DE DIARREA VIRAL BOVINA (VDVB) GENOTIPO 2 EN BOVINOS DE ENGORDE A CORRAL.

PIRANI L; MASNYI F; MARGINEDA CARLOS; DUS SANTOS, MARÍA JOSE; PECORA, ANDREA; ZIELINSKI, G

Congreso; II Reunión Transdisciplinaria en CIENCIAS AGROPECUARIAS, Santa Fe; 2017

El virus de la diarrea viral bovina (VDVB) es un Pestivirus de la familia Flaviviridae. En el VDVB se han identificado dos genotipos (genotipo I y genotipo II) y dentro de cada genotipo, cepas citopáticas y no citopáticas de acuerdo a su comportamiento en los cultivos celulares. El objetivo de este trabajo es describir los hallazgos epidemiológicos, clínicos y patológicos de un brote de diarrea viral bovina ocasionado por VDVB de genotipo 2 ocurrido en bovinos de engorde a corral en un establecimiento ubicado en el departamento Iriondo (Santa Fe). El engorde a corral donde ocurrió el episodio tenía un total de 242 animales en engorde divididos en 2 corrales. Uno de los corrales donde ocurrió la mortandad estaba constituido por 142 terneros en engorde, y los mismos provenían de un rodeo de cría de la localidad de Bouquet. A las 72 horas de arribados al establecimiento se les aplicó: vacunas para enfermedades respiratorias, clostridiales, antiparasitario endectocida y antibiótico tilmicosina. A los 15 días se repitieron las vacunas para enfermedades respiratorias y clostridiales. El corral afectado tuvo un episodio de mortandad cuya distribución fue gradual en el tiempo; comenzó a los 4 días de ingresados al engorde y en el transcurso de 45 días murieron 37 animales (37/142). Se realizó la revisación clínica de la tropa afectada y tres necropsias (N1, N2 y N3).La revisión clínica de los animales fue individual y consistió en: medición de temperatura corporal con termómetro y evaluación de los siguientes signos clínicos (diarrea, secreción nasal, secreción ocular, erosiciones en boca) asignando un score de leve, moderado o grave a cada uno. Además se recolectaron muestras de suero para realizar seroneutralización viral (SN) contra VDVB genotipo 2. Durante las necropsias se recolectaron muestras para realizar estudios histopatológicos (ganglio mesentérico, bazo, intestino delgado, intestino grueso, esófago, lengua, carrillos, pulmón, ganglio bronquial, corazón, hígado y riñón) y muestras para ensayo de detección viral del VDVB (ganglio mesentérico, bazo, intestino delgado y pulmón).Los tejidos fijados en formol bufferado al 10%, fueron procesados por técnicas de rutina y teñidos con hematoxilina y eosina. Para la detección del VDVB se procesaron los tejidos de ambas necropsias por medio de extracción de ARN viral seguido de la técnica de RT-PCR (retrotranscriptasa y luego reacción en cadena de la polimerasa) con el fin de amplificar el segmento 5´UTR (región no codificante) del VDVB. Los productos de PCR obtenidos fueron purificados con un kit comercial y luego enviados al servicio de secuenciación del CICVyA de INTA Castelar. Sobre un total de 99 animales revisados en la tropa, 95 estaban enfermos (95/99). Los resultados de la inspección clínica se resumen en la tabla 1. Los resultados de SN viral se resumen en la figura 2.En las necropsias de los 3 animales se observaron lesiones similares: costras, enrojecimiento y apelmazamiento en la piel de la región perineal, enrojecimiento y secreción purulenta en la conjuntiva ocular y nasal. Se observaron erosiones y úlceras con depósito de material blanquecino y enrojecimiento severo de las mucosas en: boca (figura 1a), morro, carrillos, encías, paladar blando, paladar duro, lengua (figura 1b), faringe, laringe, esófago (figura 1c), intestino delgado y grueso. Además se observó intensa hiperemia intestinal en íleon (figura 1d). También se observaron áreas de atelectasia afectando entre el 10-25 % del parénquima pulmonar e intensa incoagulabilidad generalizada.En el estudio histopatológico de la mucosa oral, lengua y esófago, se observó necrosis multifocal severa en el epitelio superficial, con numerosas células epiteliales mostrando hipereosinofilia citoplasmática y núcleos picnóticos además de vacuolización de células epiteliales en el estrato basal. Hubo un infiltrado inflamatorio mixto moderado, con hemorragia y exudado fibrinoso en la submucosa y muscular. Los riñones mostraron infiltrados intersticiales linfohistiociticos multifocales, hemorragias multifocales y vasculitis linfoplasmocitica. En intestinos (delgado y grueso) se observó necrosis epiteilial, criptitis, vasculitis e infiltrado inflamatorio mixto moderado, con hemorragias y exudado fibrinoso en la submucosa y muscular. En los tejidos linfoides: bazo, ganglios y placas de peyer se observó: hemorragia generalizada, edema y depleción del tejido linfoide. En todos los órganos se observó hemorragias multifocales severas. Los resultados de RT-PCR se muestran en la tabla 2. Los ensayos de secuenciación revelaron que el VDVB presente en las muestras pertenece al genotipo 2.En base a nuestros resultados podemos concluir que las cepas de Argentina de VDVB genotipo 2 pueden ocasionar episodios de alta morbilidad y mortalidad como fue observado en otros países 2. En Argentina2 el genotipo de VDVB que más circula en nuestros rodeos es el genotipo 1. La detección del VDVB- 2 en las muestras de las necropsias explica las lesiones severas encontradas. Los altos títulos de anticuerpos neutralizantes detectados en la SN viral (figura 2) indican la circulación activa del genotipo 2 de VDVB en la tropa afectada. Es importante destacar que no todas las vacunas comerciales para enfermedad respiratoria presentes en el mercado incluyen ambos genotipos, por ello, es conveniente prestar especial atención a ello al momento de establecer un programa de control para la diarrea viral bovina. Actualmente estamos realizando pasajes en cultivos de células MDBK de los tejidos positivos a la RT-PCR a fin de determinar si las cepas se comportan como citopáticas o no citopáticas.