? Almacenamiento de calostro bovino a -20°C: Presencia de células viables post-descongelamiento

DIEGO GONZALEZ; FERELLA ALEJANDRA; MARINA VALERIA MOZGOVOJ; TREVANI ANALIA; MARIA JOSE DUS SANTOS

Congreso; 17th Latin-American Buiatrics Conference and 11th Brazilian Buiatrics Conference; 2015

Los terneros recién nacidos son inmunológicamente näive al nacimiento, debido a que su desarrollo ocurre en el ambiente protectivo estéril del útero y porque la placenta, por sus características, impide la transferencia de células e inmunoglobulinas de la madre al feto. De esta manera, cobra importancia la inmunidad pasiva aportada por la madre a través del calostro. Mientras que el rol protectivo de las inmunoglobulinas transferidas por calostro ha sido bien estudiado, los mecanismos inmunológicos mediados por leucocitos calostrales están recién comenzando a conocerse. Si bien existen reportes de transferencia celular asociada a calostro fresco, poco se conoce al respecto de la presencia de células en calostro que han sido guardados a -20°C. El almacenamiento de calostros a -20°C es de rutina en muchos establecimientos donde se obtiene primeramente un calostro fresco y posteriormente se almacenan los mismos a -20°C, para que al momento de la parición puedan ser descongelados y suministrados a terneros que lo requieran. En este tipo de muestras, se ha observado con anterioridad que el componente humoral no sufre deterioro alguno en los procesos de congelado-descongelado. Nosotros, sin embargo, hemos notado también que la fracción celular permanece viable en cierto porcentaje, probablemente debido al componente graso del calostro que protegería la viabilidad de estas células y que las mantendría en un estado quiescente. Con este fin y para corroborar esta observación se trabajó con 20 calostros freezados a -20°C, a partir de los cuales se obtuvo el componente celular por purificación en gradientes de Percoll. Las células asi obtenidas fueron teñidas por coloración de Giemsa, para observar su fenotipo celular y posteriormente se les realizó ensayos de viabilidad celular por tinción con azul trypán, y con ioduro de propidio y 7-AAD por citometría (FACS). Para evaluar la proliferación de estas células calostrales, las mismas se estimularon con antígenos inespecíficos (ConA y PKW) y se determinó la misma por tinción con CFSE y FACS. Los resultados obtenidos demostraron la presencia de células que se encontraban viables post-descongelamiento y entre las cuales se pudieron individualizar por Giemsa la presencia de monocitos y linfocitos, pero con una respuesta proliferativa disminuida. Es importante destacar la presencia de células viables en este tipo de calostros que se encontraban previamente congelados ya que los mismos, son una práctica rutinaria en muchos establecimientos. Estas células podrían contribuir a la protección inmunológica total, mediada por la ingesta de calostro y recibida finalmente por el ternero neonato.