Expresión de la proteína VP2 del Virus de la Lengua Azul para el desarrollo de una vacuna a subunidad.

DANILO LEGISA; FERNANDA GONZALEZ; DANIELA RODRIGUEZ; VANESA RUIZ; MARINA VALERIA MOZGOVOJ; MARIA JOSE DUS SANTOS

CABA

Jornada; XXXIII Reunión Científica Anual de la Sociedad Argentina de Virología; 2013

AAM

Expresión de la proteína VP2 del Virus de la Lengua Azul para el desarrollo de una vacuna a subunidad. Danilo Legisa, Fernanda Gonzalez, Daniela Rodriguez, Vanesa Ruiz, Marina Mozgovoj y María José Dus Santos La Lengua Azul (LA) es una enfermedad viral, transmitida por vectores hematófagos del género Culicoides spp., afectando rumiantes domésticos y salvajes. Es considerada por la OIE como de máxima importancia para el comercio internacional de animales y productos de origen animal. El agente que ocasiona esta infección es el virus de la lengua azul (VLA), integrante de la familia Reoviridae del género Orbivirus, identificándose hasta la fecha 26 serotipos diferentes, los cuales se encuentran en distintas zonas geográficas. Los principales propósitos de la vacunación contra el VLA son: prevenir la enfermedad, limitar la dispersión del virus, lograr la erradicación de la enfermedad en un área o región determinada mediante la reducción de la circulación viral y permitir el movimiento de animales susceptibles entre zonas afectadas y zonas libres. En las últimas décadas se han desarrollado vacunas atenuadas e inactivadas eficientes para LA. Sin embargo, las desventajas en cuanto a bioseguridad y efectos adversos impulsan el desarrollo de vacunas a subunidad, no infecciosas como alternativa a las vacunas convencionales. La proteína VP2 es responsable de la neutralización viral y de la especificidad por serotipo. La existencia de 26 serotipos descriptos hasta la fecha hace que la protección proporcionada por las vacunas sea serotipo dependiente. El desarrollo de vacunas recombinantes expresando antígenos inmunorelevantes y optimizando su presentación al sistema inmune constituye una estrategia factible para generar una vacuna con la eficacia deseada. En este proyecto se propone expresar la proteína VP2 sola y fusionada a una molécula capaz de direccionar a células presentadoras de antígeno con el objetivo final de desarrollar una vacuna a subunidad para el VLA. La secuencia codificante de la proteína VP2 fue obtenida a partir de un aislado nacional de serotipo 4. A partir de ella se generaron los vectores para la expresión en células de insecto utilizando el sistema de baculovirus recombinante. De esta manera se expresó la proteína VP2 sola y fusionada a la molecula denominada APCH, la cual es un anticuerpo de cadena sencilla (scFv) que comprende una región que reconoce la cadena  del antígeno DR (Región D) de Clase II. La expresión de ambas proteínas en células de insecto se corroboró por western blot utilizando anticuerpos específicos. Para evaluar la inmunogenicidad de estos antígenos recombinantes se inmunizaron cobayos con dos dosis de cada proteína y se determinó la respuesta de anticuerpos por seroneutralización. Los resultados obtenidos indican que es factible la expresión de la proteína VP2 en células de insecto para el desarrollo de una vacuna a subunidad para el VLA.