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Introducción: La vacunación es uno de los medios más eficaces para la prevención de enfermedades infecciosas, los métodos utilizados actualmente para la producción de antígenos vacunales son tecnológicamente complejos y costosos. Las plantas transgénicas han sido identificadas como una alternativa promisoria para la producción comercial de biomoléculas. Sin embargo, una desventaja significativa en la mayoría de los casos es el bajo nivel de expresión de las proteínas recombinantes en los tejidos vegetales, lo que reduce las aplicaciones prácticas. La utilización de vacunas convencionales contra el virus de la diarrea viral bovina (VDVB) presenta ciertas limitaciones por lo que las vacunas a subunidad están siendo evaluadas como una estrategia alternativa. Previamente nuestro grupo desarrolló una vacuna a subunidad basada en plantas transgénicas de alfalfa que expresan una versión truncada de la glicoproteína E2 del VDVB sin el dominio transmembrana (E2t) capaz de inducir altos títulos de anticuerpos neutralizantes y protección contra el desafío viral en el huésped natural. Objetivo: Lograr el establecimiento de un proceso simple y econ�micamente factible que permita la manipulación de biomasa vegetal concordante con escalas industriales de producción de la proteína E2t como antígeno vacunal. Materiales y m�todos/Resultados: Se realizó la propagación vegetativa de los eventos transgénicos seleccionados. Posteriormente se establecieron las condiciones de cultivo en invernáculo, requeridas para fijar ciclos de cosecha de biomasa de 21 días, obteniendo un rendimiento de 1-1.3Kg/m2. Se estableció un protocolo de disrupción de la biomasa que mostró un rendimiento de extracción del antígeno del 82%. La clarificación del homogenato se efectuó por prensado y posterior congelado/ descongelado logrando reemplazar la centrifugación, siendo este un punto crítico del escalado. Se desarrolló un sistema de concentración y purificación parcial basado en la partición en dos fases acuosas que permitió obtener un factor de concentración de 10x suficiente para la formulación de la dosis efectiva. Por último se realizaron ensayos para evaluar la estabilidad de la proteína a lo largo del proceso, cuantificando la cantidad de antígeno en las etapas críticas mediante la técnica de ELISA, previamente desarrollada en el laboratorio (Pecora, 2009). Todo esto permitió alcanzar una capacidad productiva de 400 dosis/Kg de biomasa. Conclusiones: Se demostró la viabilidad del escalado de la obtención del antígeno a partir de plantas transgénicas de alfalfa, lo que prueba la oportunidad de desarrollar vacunas innovadoras y seguras a un costo accesible para aplicaciones veterinarias.

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