 Estudio de citoquinas por real time PCR, en células calostrales de vacas inmunizadas con una vacuna a subunidad para rotavirus bovino

DIEGO DANIEL GONZALEZ; MARIA SOL PEREZ-AGUIRREBURUALDE; MARINA VALERIA MOZGOVOJ; BELLIDO D; AYELEN SAMMARRUCO; FERNANDEZ FERNANDO; ANDRES WIGDOROVITZ; DUS SANTOS MARIA JOSE

Congreso; X Congreso Argentino de virología; 2011

AAM

En nuestro país, rotavirus bovino es una de las principales causas de diarrea en terneros neonatales causando pérdidas económicas importantes. Debido a la temprana susceptibilidad a la infección, las estrategias de prevención se basan en mejorar los niveles de inmunidad pasiva a través de la vacunación de vacas preñadas en el último tercio de gestación. Anteriormente, demostramos la capacidad de generar protección mediante la inmunización pasiva del ternero neonato, utilizando calostro proveniente de vacas inmunizadas con una vacuna a subunidad para rotavirus bovino, empleando como antígeno la proteína mayoritaria de la cápside de rotavirus bovino (VP6). La misma, constituye la proteína viral más inmunogénica, pero que presenta la característica de inducir anticuerpos no neutralizantes. Por ello, nos propusimos evaluar otros componentes de la respuesta inmune pasiva que permitan explicar el grado de protección obtenido. En este trabajo, estandarizamos la obtención de linfocitos viables a partir de calostro y la técnica de real time PCR, con el fundamento de determinar un patrón de expresión de citoquinas a través de la metodología de cuantificación relativa. Para ello, se utilizaron muestras de linfocitos de sangre y calostrales obtenidas de vacas inmunizadas con la vacuna a subunidad y con una vacuna a virus atenuado. Utilizando la metodología estandarizada se ensayó un panel de citoquinas que incluye IL4, IL6, IL10, IL12, IFNγ e IFNα. Así, se determinó un patrón de expresión de citoquinas que orientan a un perfil Th1, para el caso de la vacuna atenuada; mientras que para el caso de la vacuna a subunidad VP6 se observó una respuesta mixta con citoquinas que tienden tanto a un perfil Th1 como hacia un perfil Th2. Los resultados obtenidos, además, ayudaron a interpretar las funciones que las citoquinas sintetizadas por las células analizadas, presentan en la respuesta inmune celular del ternero.