EXPRESION DE UNA PROTEINA DE FUSION SCFV-E2T EN CELULAS CHO-K1 Y PLANTAS TRANSGENICAS DE ALFALFA PARA EL DIRECCIONAMIENTO SELECTIVO A CELULAS PRESENTADORAS DE ANTIGENOS

OSTACHUK A; CHIAVENNA S; MOZGOVOJ M; GONZALEZ D; BELLIDO D; PEREZ FILGUEIRA M; ESCRIBANO JA; RIOS R; DUS SANTOS MJ; WIGDOROVITZ A

VAQUERIAS CORDOBA

Congreso; XXVI JORNADAS CIENTIFICAS ANUALES DE LA SOCIEDAD ARGENTINA DE VIROLOGIA; 2006

SAV

El VDVB es el agente causal de una enfermedad mundialmente distribuida que afecta a bovinos de todas las edades y cuyo impacto económico radica principalmente en problemas en la reproducción junto a pérdidas industriales en productos biológicos de alto valor comercial. La utilización de vacunas convencionales para el virus de la diarrea viral bovina (VDVB) presenta la dificultad de lograr una masa suficiente de antígeno para conferir la protección adecuada. Es por eso que actualmente se está investigando el uso de vacunas a subunidad como una estrategia para solucionar este problema. La glicoproteína 53 (E2), contiene los principales sitios antigénicos para la producción de anticuerpos neutralizantes (AN), los que juegan un papel preponderante en el fenómeno de protección frente a la infección. Esta glicoproteína, entonces, constituye una excelente herramienta para ser utilizada como inmunógeno en vacunas experimentales a subunidad viral. Las células de mamíferos constituyen un sistema muy interesante para generar proteínas recombinantes eucariotas, ya que producen las modificaciones post-traduccionales correctas y reconocen las mismas señales de síntesis y procesamiento que se encuentran en el organismo original, conservando, así, la autenticidad del producto generado. Este sistema de expresión ha sido empleado con éxito para expresar diversas proteínas y estructuras virales. Entre ellas se encuentra el antígeno de superficie del virus de hepatitis B (HBsAg), constituyendo una vacuna comercial humana actualmente en uso. Un punto muy importante en la elaboración de un antígeno vacunal es garantizar que el mismo llegue eficientemente a las celulas presentadoras de antigenos (CPA) del sistemea inmune. Una forma posible de lograrlo es direccionar la proteína de interés  la CPA mediante la fusion de las mismas a la región variable de un anticuerpo de única cadena (ScFv) con especificidad contra una secuencia del complejo mayor de histocompatibilidad de clase II conservada en distintas especies de mamíferos) En este proyecto se propone expresar la proteína E2 (en su versión completa como truncada) en plantas transgénicas y en células de mamífero direccionando el producto expresado a CPA del sistema inmune. Adicionalmente se evaluará el costo / beneficio de la utilización de ambos sistemas. Consideramos que en este proyecto se aúnan dos ventajas fundamentales en cuanto a su factibilidad y complementación: (i) el contar con una proteína blanco de reconocida eficacia en la inducción de protección de los animales inmunizados cuando es utilizada como vacuna a subunidad (ii) poder potenciar la respuesta inmune de la misma mediante el direccionamiento especifico a CPA  implementando dos estrategias novedosas que aumenten significativamente los niveles de las proteínas recombinantes producidas y que permitan producir una proteína que  mantenenga intacta su condición nativa. De lograrse las metas propuesta, se contará con un conjunto de vacunas a subunidad viral con una amplia potencialidad de ser utilizada en futuras pruebas en condiciones de campo.