DESARROLLO DE UNA LINEA ESTABLE DE CELULAS CHO-K1 QUE EXPRESA CONSTITUTIVAMENTE LA GLICOPROTEINA E2 DEL VIRUS DE LA DIARREA VIRAL BOVINA

CHIAVENNA S; OSTACHUK A; MOZGOVOJ M; GONZALEZ D; BELLIDO D; DUS SANTOS MJ; WIGDOROVITZ A

VAQUERIAS CORDOBA

Congreso; XXVI JORNADAS CIENTIFICAS ANUALES DE LA SOCIEDAD ARGENTINA DE VIROLOGIA; 2006

SAV

El principal propósito de la vacunación para BVDV es la prevención de la infección congénita. La utilización de vacunas convencionales para el virus de la diarrea viral bovina (VDVB) presenta la dificultad de lograr una masa suficiente para conferir la protección adecuada. Es por eso que actualmente se esta investigando el uso de vacunas a subunidad como una estrategia para solucionar este problema. El genoma del VDVB codifica para varias proteínas estructurales que resultan altamente inmunogénicas durante la infección natural. La mayor de estas glicoproteína, la E2, contiene los principales sitios antigénicos para la producción de anticuerpos neutralizantes (AN), los que juegan un papel preponderante en el fenómeno de protección frente a la infección. Esta glicoproteína, entonces, constituye una excelente herramienta para ser utilizada como inmunógeno en vacunas experimentales a subunidad viral. El presente proyecto propone genrar una línea estable de células CHOK1 que expresa la glicoproteína E2 en forma constitutiva. Para ello se transfectaron, utilizando lipofectamina, las células con un vector que lleva la secuencia codificante de la E2 río debajo del promotor constitutivo del citomegalovirus y el gen de resistencia a zeocina como marcador de selección. La detección de la proteína se realizó por ensayo de western blot utilizando un anticuerpo monoclonal comercial. Actualmente estamos en la etapa de purificación y cuantificación de dicha proteína. Asimismo estamos  evaluando la inmunogenicidad de la misma en el modelo experimental de cobayos. Los resultados obtenidos hasta el momento demuestran la factibilidad de expresar la glicoproteína E2 en el sistema propuesto.