COMPARACIÓN DE LOS SEGMENTOS GENÓMICOS 2, 5, 7 Y 10 DE AISLADOS NACIONALES DEL VIRUS DE LA LENGUA AZUL

DANILO LEGISA; FERNANDA GONZALEZ; GABRIEL DÉSTEFANO; ANDRES WIGDOROVITZ; MARIA JOSE DUS SANTOS

CORDOBA

Jornada; XXVIII JORNADAS CIENTIFICAS ANUALES DE LA SAV; 2009

SAV

La Lengua azul (LA) es una enfermedad viral, transmitida por vectores hematófagos del género Culicoides spp. que afecta a rumiantes domésticos y salvajes y que es considerada por la OIE como de máxima importancia para el comercio internacional de animales y productos de origen animal. La infección por el VLA es endémica en áreas tropicales y templadas de la mayor parte del mundo. Las recientes incursiones del VLA en Europa han involucrado 12 países y 6 serotipos del virus, resultando en una epidemia sin precedentes en severidad y duración.En Argentina, en la provincia de Corrientes, se demostró por primera vez en el año 1999 la transmisión del VLA a bovinos pudiéndose aislar el virus y caracterizarlo serológicamente como serotipo 4. El virus pudo ser aislado en tres oportunidades más con el mismo serotipo.El genoma viral consta de 10 segmentos de RNA doble cadena que codifican para 7 proteínas estructurales (VP1 a VP7) y 4 no estructurales (NS1, NS2, Ns3 y NS3A). Se conocen hasta la fecha, 24 serotipos del virus los cuales a la vez se pueden agrupar en 10 nucleotipos diferentes.. Los segmentos génicos naturalmente presentan variación entre serotipos pero hay también variación dentro de un mismo grupo asociada con el área geográfica del aislamiento. Esto brinda la posibilidad de complementar los estudios epidemiológicos proveyendo información sobre el posible origen geográfico del aislado; este proceso se denomina genotipificación ó topotipificación. El gen L2 codifica para la proteína de la cápside VP2 y posee el mayor grado de variabilidad genética. ,VP5 contribuye con el reconocimiento de la célula hospedadora juega un rol importante sobre la conformación de VP2. En el caso de VP7 se cree que podría existir una relación directa entre la proteína y especies particulares de vector, por lo que su variación respondería a un origen geográfico correspondiente a la presencia de un tipo de Culicoide. También, el segmento S10 ha sido ampliamente analizado en su secuencia mediante lo cual se observó agrupamiento geográfico.En este trabajo se secuenciaron completamente los segmentos S10, S7, M5 y L2 de los aislados nacionales. Las secuencias obtenidas se contrastaron con secuencias disponibles en bases de datos de los correspondientes segmentos de aislados mundiales para confirmar el serotipo obtenido y para analizar la topotificacion de los mismos.Una vez realizado este análisis, se procedió a obtener las secuencias codificantes de los segmentos S7 y L2. La proteína VP7 fue expresada en bacterias y en larvas de insecto, con el fin de desarrollar ensayos diagnósticos para la detección del virus. Por otro lado, se propone expresar la proteína VP2 sola y fusionada a una molécula capaz de direccionar a células presentadoras de antígeno utilizando el sistema de baculovirus, con el objetivo final de desarrollar una vacuna a subunidad para el VLA. Conclusiones Por primera vez se lograron secuenciar los 4 segmentos mencionados del VLA de los aislados nacionales, permitiendo realizar los analisis epidemiologico-moleculares.Por otra parte se logrò expresar la proteína VP7 en bacterias y larvas de insecto con el fin de desarrollar ensayos de diagnostico.