• Desarrollo de una vacuna a subunidad contra el virus de la Diarrea Viral Bovia utilizando larvas de insecto que expresan la versión truncada de la proteína E2

ANDREA PECORA; MARIA SOL PEREZ-AGUIRREBURUALDE; CARMEN MARTINEZ; MARIA JOSE DUS SANTOS; JOSE ANGEL ESCRIBANO; ANDRES WIGDOROVITZ

CORDOBA

Jornada; XXVIII JORNADAS CIENTIFICAS ANUALES DE LA SAV; 2009

SAV

La utilización de vacunas convencionales para el virus de la diarrea viral bovina (VDVB) presenta la dificultad de lograr una masa suficiente para conferir la protección adecuada. Es por eso que actualmente se esta investigando el uso de vacunas a subunidad en sistemas heterólogos eficientes como una estrategia para solucionar este problema. La proteína E2 asi como la versión truncada (E2T) contiene los principales sitios antigénicos para la producción de anticuerpos neutralizantes (AN), los que juegan un papel preponderante en el fenómeno de protección frente a la infección. La expresión en larvas de insecto mediante la utilización de baculovirus recombinantes ofrece una plataforma versátil, económica y muy eficiente En este trabajo se presentan los resultados correspondientes a la generación de la proteína recombinante así como la evaluación de  las vacunas experimentales formuladas con la proteína E2T en cobayos y en bovinos. Metodología y Resultados Se desarrollo el baculovirus recombinante y se procedió a producir la proteína recombinante a partir de la infección de larvas de Trichoplusia ni. Se cuantifico la proteína y se  realizó  un ensayo de dosis-respuesta en modelo cobayo. Para ello s utilizaron 5 animales por grupo, los cuales recibieron 2 inoculaciones intramusculares de 1 ml de vacuna en intervalos de 30 días. Luego de cada inoculación, los animales fueron sangrados y los sueros fueron evaluados  por seroneutralización obteniéndose  títulos mayores a 2. A continuación se evaluó la eficacia de la vacuna en el huesped natural. Se formaron 3 grupos de 4 animales cada uno, se inmunizaron intramuscularmente con 3 ml de vacuna conteniendo 2 ugr de E2T ; Virus inactivado  (10 6.5 DL50) y  2ugr una proteína no relacionada como control negativo.  A los 30 días se boostearon y se sangraron a los 60 días post inoculación. Se analizaron los sueros por seroneutralización  y ELISA.. Los animales seroconvirtieron a los 45 dpv y desarrollaron importantes títulos de anticuerpos neutralizantes. CONCLUSIONES Los resultados obtenidos demuestran la factibilidad de utilizar la proteína E2T expresada en larvas de insecto como una vacuna a subunidad, ya que la misma ha resultado ser inmunogénica en modelo cobayo y en el  huésped natural.