Caracterización de Trichoderma con marcadores moleculares ISSR y RAPD

STENGLEIN, S.A.; MARTÍNEZ ALCÁNTARA, V.; SAPARRAT, M.C.N.; BONFIGLIO, C.; BALATTI, P.A.

Instituto de Investigaciones de Sanidad Vegetal, Ciudad de la Habana, Cuba.

Taller; “Taller Latinoamericano de Biocontrol de Fitopatógenos con Trichoderma y otros Antagonistas”; 2006

Instituto de Investigaciones de Sanidad Vegetal, Ciudad de la Habana, Cuba.

Trichoderma es un género de hongos de la Clase Deuteromicetes que controla patógenos del suelo debido a su velocidad de crecimiento y desarrollo, y a que producen inhibidores del crecimiento. Se han identificado 33 especies las que se caracterizan por el color verde del micelio. El objetivo de este trabajo fue caracterizar con marcadores moleculares del tipo Inter-Simple Sequence Repeats (ISSR) y Random Amplified Polimorphic DNA (RAPD) diversas especies de Trichoderma que se están evaluando en lo que hace a su capacidad para controlar los patógenos causantes del damping-off. Se analizaron los patrones de amplificación de tres cepas de T. harzianum, dos de T. koningii, una de T. aurioviride, una de T. virens y una de Gliocladium roseum. La amplificación de los fragmentos se realizó con 15 primers ISSR en un termociclador, visualizando el ADN luego de la electroforesis con bromuro de etidio y UV. El análisis de agrupamiento se realizó con los marcadores generados por 10 primers. Todos los marcadores generaron un patrón de amplificación claro y reproducible para cada aislamiento, amplificando un total de 171 banadas, de las cuales 163 fueron polimórficas. El fenograma obtenido a partir de la matriz de similitud de Jaccard permitió agrupar a las cepas bajo estudio. Los marcadores ISSR permitieron identificar y diferenciar los aislamientos y generar fingerprints específicos. Las amplificaciones con primers RAPD tienen como objetivo identificar marcadores específicos.