Expresión aumentada de ICAM-1 en células NK pleurales (LP-NK) de paciente con tuberculosis (TB): potencial rol de la estimulación local de células T

SCHIERLOH P, YOKOBORI N, ALEMAN M, GEFFNER L, BALBOA L, ROMERO MM, BASILE JI, MUSELLA R, CASTAGNINO J, ABBATE E, DE LA BARRERA S, SASIAIN MC.

La Falda, Córdoba

Congreso; Congreso de la Sociedad Argentina de Inmunología.; 2008

SAI

Estudios recientes basados en gen¨®mica y prote¨®mica comparativa sostienen que las NK humanas adquieren, luego de su activación, un fenotipo "CPA-like", pudiendo inducir la proliferación de células T mediante la expresión de moléculas coestimulatorias. En consonancia, en este trabajo encontramos que las LP-NK de pacientes TB, expresan mayor densidad superficial de la mol¨¦cula de adhesión intercelular-1 (ICAM-1/CD54) que su contraparte periférica (-3,5 veces más que en PB-NK en promedio, n=9, p<0.005). Más ún, el análisis de los subsets NK C056dim y C056bright demuestra que existe una expresión diferencial de ICAM-1 y de su receptor LFA-1 (C011a) (n=6, p<0.05). Como comparación, analizamos ICAM-1 en otras poblaciones linfocitarias y hallamos que solo los linfocitos LP-T C04+ aumentan modesta aunque significativa mente esta molécula (n=6, p<0.05). A fin de reproducir in vitro estas observaciones, estimulamos PBMC de donantes normales con diferentes combinaciones de monoquinas abundantes en LP de pacientes TB (IL-12, IL-15 e IL-18) y con agonistas de los receptores tipo TolI 2 y 4, ambos involucrados en el reconocimiento de la micobacteria. Al término del cultivo determinamos la densidad de ICAM-1 junto con la expresión del marcador de activación C069 y observamos que las NK que expresan alta densidad de ICAM-1, son a su vez CD69. Finalmente, efectuamos co-cultivos de células NK activadas o no, con linfocitos T autólogos y monitoreamos la formación de conjugados en presencia y ausencia del anticuerpo neutralizante anti-ICAM-1. En este punto encontramos una inhibición parcial en la formación de conjugados cuando los ensayos se realizan en presencia de anti-ICAM-l. Estos resultados indican que el aumento de ICAM-1 en NK presentes en el sitio de infección podr¨ªa contribuir a la activación local de células T. conjugados en presencia y ausencia del anticuerpo neutralizante anti-ICAM-1. En este punto encontramos una inhibición parcial en la formación de conjugados cuando los ensayos se realizan en presencia de anti-ICAM-l. Estos resultados indican que el aumento de ICAM-1 en NK presentes en el sitio de infección podr¨ªa contribuir a la activación local de células T. ICAM-1 en otras poblaciones linfocitarias y hallamos que solo los linfocitos LP-T C04+ aumentan modesta aunque significativa mente esta molécula (n=6, p<0.05). A fin de reproducir in vitro estas observaciones, estimulamos PBMC de donantes normales con diferentes combinaciones de monoquinas abundantes en LP de pacientes TB (IL-12, IL-15 e IL-18) y con agonistas de los receptores tipo TolI 2 y 4, ambos involucrados en el reconocimiento de la micobacteria. Al término del cultivo determinamos la densidad de ICAM-1 junto con la expresión del marcador de activación C069 y observamos que las NK que expresan alta densidad de ICAM-1, son a su vez CD69. Finalmente, efectuamos co-cultivos de células NK activadas o no, con linfocitos T autólogos y monitoreamos la formación de conjugados en presencia y ausencia del anticuerpo neutralizante anti-ICAM-1. En este punto encontramos una inhibición parcial en la formación de conjugados cuando los ensayos se realizan en presencia de anti-ICAM-l. Estos resultados indican que el aumento de ICAM-1 en NK presentes en el sitio de infección podr¨ªa contribuir a la activación local de células T. conjugados en presencia y ausencia del anticuerpo neutralizante anti-ICAM-1. En este punto encontramos una inhibición parcial en la formación de conjugados cuando los ensayos se realizan en presencia de anti-ICAM-l. Estos resultados indican que el aumento de ICAM-1 en NK presentes en el sitio de infección podr¨ªa contribuir a la activación local de células T. de su receptor LFA-1 (C011a) (n=6, p<0.05). Como comparación, analizamos ICAM-1 en otras poblaciones linfocitarias y hallamos que solo los linfocitos LP-T C04+ aumentan modesta aunque significativa mente esta molécula (n=6, p<0.05). A fin de reproducir in vitro estas observaciones, estimulamos PBMC de donantes normales con diferentes combinaciones de monoquinas abundantes en LP de pacientes TB (IL-12, IL-15 e IL-18) y con agonistas de los receptores tipo TolI 2 y 4, ambos involucrados en el reconocimiento de la micobacteria. Al término del cultivo determinamos la densidad de ICAM-1 junto con la expresión del marcador de activación C069 y observamos que las NK que expresan alta densidad de ICAM-1, son a su vez CD69. Finalmente, efectuamos co-cultivos de células NK activadas o no, con linfocitos T autólogos y monitoreamos la formación de conjugados en presencia y ausencia del anticuerpo neutralizante anti-ICAM-1. En este punto encontramos una inhibición parcial en la formación de conjugados cuando los ensayos se realizan en presencia de anti-ICAM-l. Estos resultados indican que el aumento de ICAM-1 en NK presentes en el sitio de infección podr¨ªa contribuir a la activación local de células T. conjugados en presencia y ausencia del anticuerpo neutralizante anti-ICAM-1. En este punto encontramos una inhibición parcial en la formación de conjugados cuando los ensayos se realizan en presencia de anti-ICAM-l. Estos resultados indican que el aumento de ICAM-1 en NK presentes en el sitio de infección podr¨ªa contribuir a la activación local de células T. ICAM-1 en otras poblaciones linfocitarias y hallamos que solo los linfocitos LP-T C04+ aumentan modesta aunque significativa mente esta molécula (n=6, p<0.05). A fin de reproducir in vitro estas observaciones, estimulamos PBMC de donantes normales con diferentes combinaciones de monoquinas abundantes en LP de pacientes TB (IL-12, IL-15 e IL-18) y con agonistas de los receptores tipo TolI 2 y 4, ambos involucrados en el reconocimiento de la micobacteria. Al término del cultivo determinamos la densidad de ICAM-1 junto con la expresión del marcador de activación C069 y observamos que las NK que expresan alta densidad de ICAM-1, son a su vez CD69. Finalmente, efectuamos co-cultivos de células NK activadas o no, con linfocitos T autólogos y monitoreamos la formación de conjugados en presencia y ausencia del anticuerpo neutralizante anti-ICAM-1. En este punto encontramos una inhibición parcial en la formación de conjugados cuando los ensayos se realizan en presencia de anti-ICAM-l. Estos resultados indican que el aumento de ICAM-1 en NK presentes en el sitio de infección podr¨ªa contribuir a la activación local de células T. conjugados en presencia y ausencia del anticuerpo neutralizante anti-ICAM-1. En este punto encontramos una inhibición parcial en la formación de conjugados cuando los ensayos se realizan en presencia de anti-ICAM-l. Estos resultados indican que el aumento de ICAM-1 en NK presentes en el sitio de infección podr¨ªa contribuir a la activación local de células T. dim y C056bright demuestra que existe una expresión diferencial de ICAM-1 y de su receptor LFA-1¦Á (C011a) (n=6, p<0.05). Como comparación, analizamos ICAM-1 en otras poblaciones linfocitarias y hallamos que solo los linfocitos LP-T C04+ aumentan modesta aunque significativa mente esta molécula (n=6, p<0.05). A fin de reproducir in vitro estas observaciones, estimulamos PBMC de donantes normales con diferentes combinaciones de monoquinas abundantes en LP de pacientes TB (IL-12, IL-15 e IL-18) y con agonistas de los receptores tipo TolI 2 y 4, ambos involucrados en el reconocimiento de la micobacteria. Al t¨¦rmino del cultivo determinamos la densidad de ICAM-1 junto con la expresión del marcador de activación C069 y observamos que las NK que expresan alta densidad de ICAM-1, son a su vez CD69. Finalmente, efectuamos co-cultivos de células NK activadas o no, con linfocitos T autólogos y monitoreamos la formación de conjugados en presencia y ausencia del anticuerpo neutralizante anti-ICAM-1. En este punto encontramos una inhibición parcial en la formación de conjugados cuando los ensayos se realizan en presencia de anti-ICAM-l. Estos resultados indican que el aumento de ICAM-1 en NK presentes en el sitio de infección podría contribuir a la activación local de células T. conjugados en presencia y ausencia del anticuerpo neutralizante anti-ICAM-1. En este punto encontramos una inhibición parcial en la formación de conjugados cuando los ensayos se realizan en presencia de anti-ICAM-l. Estos resultados indican que el aumento de ICAM-1 en NK presentes en el sitio de infección podría contribuir a la activación local de células T. ICAM-1 en otras poblaciones linfocitarias y hallamos que solo los linfocitos LP-T C04+ aumentan modesta aunque significativa mente esta molécula (n=6, p<0.05). A fin de reproducir in vitro estas observaciones, estimulamos PBMC de donantes normales con diferentes combinaciones de monoquinas abundantes en LP de pacientes TB (IL-12, IL-15 e IL-18) y con agonistas de los receptores tipo TolI 2 y 4, ambos involucrados en el reconocimiento de la micobacteria. Al t¨¦rmino del cultivo determinamos la densidad de ICAM-1 junto con la expresión del marcador de activación C069 y observamos que las NK que expresan alta densidad de ICAM-1, son a su vez CD69. Finalmente, efectuamos co-cultivos de células NK activadas o no, con linfocitos T autólogos y monitoreamos la formación de conjugados en presencia y ausencia del anticuerpo neutralizante anti-ICAM-1. En este punto encontramos una inhibición parcial en la formación de conjugados cuando los ensayos se realizan en presencia de anti-ICAM-l. Estos resultados indican que el aumento de ICAM-1 en NK presentes en el sitio de infección podría contribuir a la activación local de células T. conjugados en presencia y ausencia del anticuerpo neutralizante anti-ICAM-1. En este punto encontramos una inhibición parcial en la formación de conjugados cuando los ensayos se realizan en presencia de anti-ICAM-l. Estos resultados indican que el aumento de ICAM-1 en NK presentes en el sitio de infección podría contribuir a la activación local de células T. ¦Á (C011a) (n=6, p<0.05). Como comparación, analizamos ICAM-1 en otras poblaciones linfocitarias y hallamos que solo los linfocitos LP-T C04+ aumentan modesta aunque significativa mente esta molécula (n=6, p<0.05). A fin de reproducir in vitro estas observaciones, estimulamos PBMC de donantes normales con diferentes combinaciones de monoquinas abundantes en LP de pacientes TB (IL-12, IL-15 e IL-18) y con agonistas de los receptores tipo TolI 2 y 4, ambos involucrados en el reconocimiento de la micobacteria. Al término del cultivo determinamos la densidad de ICAM-1 junto con la expresión del marcador de activación C069 y observamos que las NK que expresan alta densidad de ICAM-1, son a su vez CD69. Finalmente, efectuamos co-cultivos de células NK activadas o no, con linfocitos T autólogos y monitoreamos la formación de conjugados en presencia y ausencia del anticuerpo neutralizante anti-ICAM-1. En este punto encontramos una inhibición parcial en la formación de conjugados cuando los ensayos se realizan en presencia de anti-ICAM-l. Estos resultados indican que el aumento de ICAM-1 en NK presentes en el sitio de infección podría contribuir a la activación local de células T. conjugados en presencia y ausencia del anticuerpo neutralizante anti-ICAM-1. En este punto encontramos una inhibición parcial en la formación de conjugados cuando los ensayos se realizan en presencia de anti-ICAM-l. Estos resultados indican que el aumento de ICAM-1 en NK presentes en el sitio de infección podría contribuir a la activación local de células T. , con linfocitos T autólogos y monitoreamos la formación de conjugados en presencia y ausencia del anticuerpo neutralizante anti-ICAM-1. En este punto encontramos una inhibición parcial en la formación de conjugados cuando los ensayos se realizan en presencia de anti-ICAM-l. Estos resultados indican que el aumento de ICAM-1 en NK presentes en el sitio de infección podría contribuir a la activación local de c¨¦lulas T.