INVESTIGADORES
MARTIN Valentina
congresos y reuniones científicas
Título:
Efecto de la optimización de codones y de la localización subcelular en la expresión del antígeno SAG1 de Toxoplasma gondii en hojas de tabaco y análisis de la inmunogenicidad en ratones
Autor/es:
LAGUÍA-BECHER MELINA, MARTIN VALENTINA, GOLDMAN ALEJANDRA, CORIGLIANO MARIANA, CLEMENTE MARINA
Reunión:
Congreso; VII Simposio nacional de biotecnologia REDBIO-Argentina- II Congreso Internacional-REDBIO-Argentina; 2009
Resumen:
En este trabajo se
analizó el efecto de la optimización de codones y la localización subcelular
sobre la expresión transiente del antígeno SAG178-322 de Toxoplasma
gondii en hojas de tabaco. Además, se realizaron inmunizaciones intraperitoneal
y subucutánea en ratones con extractos vegetales expresando dicho antígeno. Se
adecuó la secuencia de SAG178-322 al uso de codones de Nicotiana
tabacum y se obtuvieron versiones que permitirían la acumulación de la
proteína en el retículo endoplásmico o en el apoplasto. La modificación de 58
nucléotidos de la secuencia que codifica para la proteína SAG178-322
no mejoró la expresión de la misma. Por otro lado, los niveles de expresión de
la versión nativa permite la retención de SAG178-322 en el RE fue
mayor que las versiones que envían la proteína al apoplasto. Sin embargo, la
acumulación del ARNm fue mayor para la versión vegetalizada de retención
al RE. En cuanto a los ensayos de inmunización, los ratones inmunizados
intraperitonealmente con los extractos vegetales expresando SAG178-322 combinado
o no con otro antígeno de T. gondii (GRA4) también expresado en plantas
mostraron una reducción significativa de la carga parasitaria cerebral
comparada con el grupo control pese a que no se evidenció la generación de una
respuesta humoral específica. Sin embargo, en las inmunizaciones subcutáneas
con extracto expresando SAG178-322, donde también se había observado
inmunoprotección y respuesta humoral, se observó un aumento significativo en el
test de hipersensibilidad retardada (DTH) en el grupo inmunizado, sugiriendo la
generación de una respuesta celular específica.