Participación de PKC en la regulación del ciclo celular por PTH en las células intestinales Caco-2

CALVO NATALIA; RUSSO DE BOLAND ANA; GENTILI, CLAUDIA

Mar del Plata

Congreso; LVI Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica (SAIC); 2011

SAIC

La hormona paratiroidea (PTH) es un importante mediador de la remodelación ósea y actúa como regulador esencial de la homeostasis del calcio. PTH también puede estimular o inhibir la proliferación celular y provocar alteraciones en la regulación del ciclo celular. En estudios previos demostramos que la hormona es pro-apoptótica y que además afecta la progresión del ciclo celular en las células intestinales Caco-2 incrementando el porcentaje de células en la fase G0/G1, aumentando la expresión de la proteína inhibitoria p27Kip1 y disminuyendo la expresión de las ciclinas D1 y D3 y de la quinasa Cdk6. El objetivo de este trabajo es profundizar el estudio de los mecanismos moleculares involucrados en el efecto anti-proliferativo de PTH en estas células intestinales. Para tal fin, las células Caco-2 fueron pre-incubadas con los inhibidores de la quinasa amino terminal de c-Jun (JNK) (SP600125, 20 mM), de la proteína fosfatasa 2A (PP2A) (acido okadaico, 1 nM y caliculina A, 3 nM) o de la proteína quinasa C (PKC) (Ro-31-8220, 200 nm; BIM, 5 μM y queleritrina, 2 μM) y luego fueron tratadas con  PTH (10-8 M, 6 horas), seguido de análisis por Western blot de los componentes del ciclo celular. La inhibición de la actividad de JNK y de PP2A no revirtió la respuesta hormonal, lo que sugiere que el efecto de PTH en la expresión de reguladores del ciclo es independiente de la vía de señalización de JNK y de PP2A. Sin embargo, los inhibidores de PKC revirtieron el aumento en la expresión de p27Kip1 y la disminución de los niveles proteicos de las ciclinas D1 y D3 y de la quinasa Cdk6 inducida por PTH. Estos resultados sugieren que en las células Caco-2, el efecto anti-proliferativo de PTH es mediado por cambios en la expresión de proteínas reguladoras del ciclo celular a través de la vía de señalización de PKC.