Presencia de variantes polimórficas del virus de Epstein Barr en pacientes pediátricos con infección aguda. Comparación con linfomas pediátricos EBV+

LORENZETTI, M.; MOSCATELLI G; MORONI S; GUTIERREZ, M; ALTCHEH J; PAOLA ANDREA CHABAY; PRECIADO, M. V.

Buenos Aires

Congreso; 9no Congreso Argentino de Virología; 2008

Sociedad Argentina de Virología

El virus de Epstein-Barr (EBV), agente causal de la mononucleosis infecciosa (MI), ha sido relacionado con neoplasias, como linfoma de Hodgkin (LH), Burkitt (LB) y carcinoma nasofaríngeo. Existen 2 tipos, EBV1 y EBV2, que se diferencian por polimorfismos en los genes EBNA2, 3A, 3B y 3C. Se han descrito marcadores polimórficos en los genes que codifican para EBNA1, BZLF1 y LMP1, que permiten distinguir variantes virales, las cuales podrían asociarse al origen geográfico, la distribución en diferentes compartimentos o a la presencia o ausencia de tumores. Se desconoce la distribución de éstas variantes en niños con infección aguda. El objetivo de este trabajo fue estudiar la distribución de variantes de los genes que codifican para EBNA1, BZLF1 y LMP1 en niños con infección aguda por EBV en diferentes compartimentos y en linfomas pediátricos. Se estudiaron secreciones faríngeas y células mononucleares de sangre periférica (CMSP) de 8 niños con infección aguda por EBV diagnosticada por serología IgM+ por IFI y 11 biopsias ganglionares de niños con linfoma EBV+ (3 LB y 8 LH). Se realizaron 4 estrategias de PCR: 1) EBNA3C (tipificación), 2) región C-terminal (Ct) de LMP-1 para determinar presencia de la deleción de 30pb (del30) y de repeticiones de 33pb, 3) región Ct de EBNA1, 4) región promotora de BZLF1. Se realizó la secuenciación directa de los amplicones y se determinó la carga viral en plasma por PCR en tiempo real de los pacientes con infección aguda. En secreciones faríngeas: 7/8 casos fueron EBV1 y 1/8 EBV 2; los polimorfismos de EBNA1 fueron identificados como P-thr´´ en 1/8 casos, P-thr´ en 4/8 casos, V-leu en 1/8 casos y una variante de leucina derivada de la línea celular Ag876 en 2/8 casos; la región Ct de LMP1 mostró 6/8 con del30 y 2/8 wild type mientras que 4/8 casos presentaron 5 ½ repeticiones más una inserción de 15 pb, 2/8 presentaron 4 ½ rep, 1/8 casos presentó 5 ½ rep. y otro caso 4 ½ rep más la inserción; los polimorfismos de la región promotora de BZLF1 fueron Zp-P en 6/8 casos y Zp-V3 1/8 (1/8 no amplificó). Todas las muestras de CMSP fueron negativas con un round de PCR para los tres genes analizados. La carga viral en infección aguda mostró valores de 585 y 510 copias/ml en 2/8 pacientes y valores inferiores al límite de detección (200 copias/ml) en 6/8. En muestras de linfomas 7/11 fueron EBV1 y 4/11 EBV2; los polimorfismos de EBNA1 amplificaron en 8/11 casos: 1/8 P-thr´, 2/8 P-ala´´, 1/8 V-leu, 3/8 variante de leucina derivada de la línea celular Ag876 y 1/8 una variante V-leu no descripta previamente; la región Ct de LMP1 mostró 7/11 con del30 y 4/11 wild type mientras que para la región repetitiva amplificaron 9/11 casos: 5/9 presentaron 5 ½ repeticiones más una inserción de 15 pb, 1/9 4 ½ rep, 3/9 5 ½ rep; Los polimorfismos de la región promotora de BZLF1 amplificaron en 6/11 y todos fueron Zp-V3. En las secreciones de cada paciente se observó infección con una única variante viral por secuenciación directa. Las variantes polimórficas para EBNA1 halladas coincidieron con otras previamente descriptas en pacientes adultos en otras regiones geográficas. Se observó una alta proporción de las variantes Zp-P de BZLF1 (85%) y del30 de LMP1 (75%) en secreciones faríngeas de pacientes con infección aguda, las cuales se habían descrito con mayor frecuencia en patologías neoplásicas EBV+. Las variantes encontradas en tumores coincidieron con otras previamente descritas en estas patologías. Los bajos valores de carga viral en sangre podrían explicar, en parte, la dificultad para amplificar el ADN de CMSP. Este trabajo constituye el primer estudio de variantes virales en pacientes pediátricos con infección aguda por EBV