Caracterización de variantes polimórficas en la infección por el virus de Epstein-Barr en pacientes pediátricos

LORENZETTI, M.; PAOLA ANDREA CHABAY; MOSCATELLI G; FERNANDEZ C; MORONI S; ALTCHEH J; PRECIADO MV

Ciudad de Buenos Aires

Congreso; 6º Congreso Argentino de Infectología Pediátrica; 2008

El virus de Epstein Barr (EBV) ha sido relacionado con patologías malignas, como linfomas y carcinoma nasofaríngeo. Existen 2 tipos, EBV1 y EBV2. Se han descripto marcadores polimórficos en los genes EBNA1, BZLF1 y LMP1, que permiten distinguir variantes virales. Objetivo: Estudiar la distribución de tipos y variabilidad molecular de los genes EBNA1, BZLF1 y LMP1, en muestras de hisopados faríngeos y células mononucleares de sangre periférica (CMSP) de pacientes pediátricos con infección por EBV. Materiales y Métodos: Se estudiaron tres pacientes con infección por EBV diagnosticada por serología IgM+. Fueron realizadas 4 estrategias de PCR: 1) EBNA3C (tipificación viral), 2) Región C terminal (Ct) de LMP-1, para determinar presencia de una deleción de 30pb y de repeticiones de 33pb. 3) Región Ct de EBNA1, 4) Región promotora de BZLF1. Se realizó la secuenciación directa y se determinó la carga viral en plasma por PCR en tiempo real. Resultados: Los tres casos estudiados fueron EBV1. En las muestras de hisopados faringeos las variantes de EBNA1 fueron identificadas como P-thr´, P-thr´´,y una variante derivada de la linea Ag876. No se encontraron en ninguna de las muestras mutaciones en la secuencia promotora de BZLF1. En la región Ct de LMP1 se observó que 2/3 casos poseían la deleción de 30 pb y 1/3 fue wild type. Un paciente presentó 4 ½ repeticiones más una inserción de 15 pb en la tercer repetición. Otro paciente presentó 5 ½ repeticiones. El ADN del tercer paciente no pudo ser amplificado para determinar las repeticiones de 33 pb. Se detectaron mutaciones puntuales previamente descriptas en los tres pacientes. Ninguna de las muestras de ADN de las CMSP pudo ser amplificada. La carga viral por PCR en tiempo real mostró valores inferiores al límite de detección (200 copias/ml) en los 3 pacientes. Conclusiones: En todos los hisopados se confirmó la infección con una única variante viral, que coincidían con otras descriptas en diferentes regiones geográficas. Se observó en 2 de los 3 casos la variante delecionada de 30 pb de LMP1, la cual esta más asociada a tumores EBV+. En el promotor de BZLF1 se detectó la variante Zp-P, previamente descripta en neoplasias EBV+. Los bajos valores de carga viral en plasma podrían deberse a que el inóculo inicial de virus en pacientes pediátricos sería menor que en pacientes adolescentes o adultos. Estos bajos valores de carga viral en sangre podrían explicar la dificultad para amplificar el ADN de PBMC.