La estimulación b-adrenérgica (bA) induce la activación de óxido nítrico cintaza (NOS) mediante la activación de proteína quinasa C (PKC) en una línea celular de linfoma

G. GORELIK, M.L. BARREIRO ARCOS, A.J. KLECHA Y G. CREMASCHI

Buenos Aires, Argentina

Congreso; XLVI Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica; 2001

Sociedad Argentina de Investigación Clínica

  Previamente describimos una disminuída expresión de receptores badrenérgicos (RbA), desacoplados a la adenilato ciclasa, pero acoplados a la activación de PKC en células de linfoma T murino BW 5147 (BW). Con el fin de verificar la participación de otros caminos intracelulares, estudiamos la actividad de NOS en éstas células y su modulación por el agonista bA isoproterenol (ISO). Encontramos una alta actividad de NOS ( determinada por formación de 14C-citrulina) en las células BW, que fue bloqueada por staurosporina (Stau), GF109203X (GF), L-Name y Aminoguanidina (AG) (Basal: 97.8 ± 9.3 vs Stau: 41.0 ± 4.2; GF: 37.1 ± 3.5; L-Name: 15.3 ± 1.8 o AG: 23.7 ± 2.6 pmol/107 cel, p<0.01). Por western blot se encontró expresión de la isoforma calcio-independiente, NOS II, no detectable por incubación en presencia de Stau. El ISO indujo un incremento de la actividad de NOS (Basal: 86.9 ± 8.7 vs ISO (10-5 M): 167.6 ± 13.1, p<0.01), bloqueable por el antagonista bA, propanolol (PROP) y el b2-selectivo, butoxamina (BUTOX) (% de inhibición: PROP: 86.1 ± 7.3; BUTOX: 63.1 ± 5.4). Dado que la estimulación de bA por ISO induce la traslocación de PKC, podemos concluir que la activación de NOS por el agonista bA involucraría a la isoforma II y sería mediada por PKC. Estos resultados sugerirían que los RbA se acoplan a señales intracelulares que regulan positivamente la actividad de las células de linfoma T BW a diferencia de lo descripto en linfocitos T normales.