Caracterización de la proteína VP6 de rotavirus como sistema de presentación de antígenos heterólogos

PERALTA ANDREA; LOPEZ M. GABRIELA; TABOGA OSCAR; CARRILLO ELISA

Bariloche, Prov. de Río Negro

Congreso; XXXIX Anual Meeting SAIB, International Protein Symposium; 2003

SAIB

El objetivo general del proyecto es evaluar el empleo de partículas semejantes a virus (VLPs) basadas en la proteína VP6 de rotavirus como sistema de presentación de antígenos heterólogos. Debido a la estructura espacial de las VLPs, los sitios antigénicos son presentados al sistema inmune de manera multimérica, asociados a proteínas inmunogénicas. Además, estas VLPs no replican y no son infecciosas. Con el objeto de investigar los posibles sitios de inserción de secuencias foráneas en la proteína VP6, se eligió el epitope V5 de 14aa. Se seleccionaron seis posibles sitios de inserción de epitopes foráneos. Ellos corresponden a las posiciones aminoacídicas 14, 101, 146, 235, 382 y la posición N-terminal. Las proteínas quiméricas VP6-V5 fueron expresadas en el sistema baculovirus-células de insecto y se obtuvieron altos niveles de expresión para todas las versiones ensayadas. La versión VP614 es capaz de formar trímeros, pero no es reconocida por un suero policlonal anti-VP6, mientras que sí lo es por un monoclonal anti-V5, indicando que mediante la inserción se está interrumpiendo un sitio antigénico importante de la proteína VP6. La versión VP6235 no es capaz de formar trímeros. Las versiones restantes son capaces de formar trímeros y son reconocidas por el suero policlonal anti-VP6 y por el monoclonal anti-V5. En este momento se está evaluando la inmunogenecidad de las diferentes construcciones