Utilización como inmunógeno de un baculovirus que expresa en su superfice la glicoproteína gD del virus Herpes bovino tipo 1

PERALTA ANDREA; MOLINARI PAULA; CONTEGRAND DANIELA; CALAMANTE GABRIELA; TABOGA OSCAR

Vaquerías, Prov de Córdoba

Jornada; XXIV Reunión Científica Anual de la Sociedad Argentina de Virología; 2004

Sociedad Argentina de Virología

Este trabajo describe la construcción del baculovirus recombinante (AcSup-gD) que presenta expuesta en su superficie y en la membrana de las células que infecta una proteína de fusión entre la glicoproteína baculoviral gp64 y la glicoproteína gD del virus Herpes Bovino tipo1 (BHV-1), su caracterización antigénica por reactividad con monoclonales anti-gD o sueros de animales vacunados contra BHV-1, así como tambien su utilización como inmunógeno. Cuando este baculovirus recombinante es usado como antígeno en un Western-blot, tanto el monoclonal anti-gD como los sueros policlonales anti-BHV1 son capaces de reconocer la proteína de fusión gp64-gD. Con preparaciones purificadas de AcSup-gD, Ac-gp64 (baculovirus que sobreexpresa la glicoproteina gp64), gD expresada en bacterias y con BHV-1, se inocularon ratones Balb/C por vía i.p. A distintos tiempos post-inoculación se tomaron muestras de sueros que fueron analizadas mediante la técnica de ELISA. El grupo de animales inmunizados con AcSup-gD desarrolló una respuesta inmune específica contra gD, desde la primera inmunización. El título de anticuerpos fue aumentando con el número de inmunizaciones. Se analizó también la presencia de anticuerpos neutralizantes mediante un ensayo de seroneutralización en células MDBK frente a BHV-1. Los sueros de los animales inmunizados con Sup-gD mostraron capacidad de neutralizar al virus, a diferencia del grupo de animales inmunizados con la proteína expresada en bacterias, señalando la importancia de la glicosilación en la actividad protectora de la glicoproteína gD.