Un baculovirus quimérico expresa en su superficie la glicoproteína gD como vacuna contra el herpes bovino

PERALTA ANDREA; MOLINARI PAULA; CONTEGRAND DANIELA; CALAMANTE GABRIELA; TABOGA OSCAR

Buenos Aires

Congreso; VIII Congreso Argentino de Virología; 2005

Sociedad Argentina de Virología

El sistema de presentación mediante baculovirus, o baculovirus display, presenta numerosas ventajas potenciales como vehículo vacunal: su naturaleza particulada, el efecto inmunoestimulatorio de muchas de las proteínas virales, la presentación multimérica de epitopes y la adecuada conformación espacial de los antígenos en la superficie del virión, que los hacen accesibles a las interacciones con los diferentes componentes del sistema inmune. El herpesvirus bovino 1 (BHV-1) es el causante de numerosas enfermedades en el ganado bovino. Las vacunas actuales basadas en virus inactivado o modificado presentan un número importante de desventajas. Por estas razones está siendo explorada la vacunación con subunidades del BHV-1. Este trabajo describe la construcción del baculovirus recombinante (AcSup-gD) que presenta expuesta en su superficie una proteína de fusión entre la glicoproteína baculoviral gp64 y la glicoproteína gD del herpesvirus bovino tipo1 (BHV-1). Se ha ensayado la correcta multimerización y exposición en la superficie del virión de la proteína de fusión gp64-gD mediante inmunomicroscopía electrónica, así como sus propiedades antigénicas en el modelo ratón. Con preparaciones purificadas de AcSup-gD, Ac-gp64 (baculovirus que sobreexpresa la glicoproteina gp64), gD expresada en bacterias y con BHV-1, se inocularon ratones Balb/C por vía i.p. A distintos tiempos post-inoculación se tomaron muestras de sueros que fueron analizadas mediante ensayos de ELISA. El grupo de animales inmunizados con AcSup-gD desarrolló una respuesta inmune específica contra gD, desde la primera inmunización. El título de anticuerpos fue aumentando con el número de inmunizaciones. En ensayos de seroneutralización en células MDBK frente a BHV-1, los sueros de los animales inmunizados con Sup-gD mostraron capacidad de neutralizar al virus, a diferencia del grupo de animales inmunizados con la proteína expresada en bacterias, señalando la importancia de la glicosilación y el correcto plegamiento en la actividad protectora de la glicoproteína gD. En base a estos resultados, concluimos que la proteína de fusión gp64-gD se expresa correctamente en la superficie de los baculovirus recombinantes y su utilización como inmunógeno desarrolla una respuesta humoral específica y neutralizante frente a BHV-1, demostrando que estos baculovirus pueden ser excelentes candidatos para desarrollar vacunas a subunidades contra el herpes bovino.