CARACTERIZACIÓN FENOTÍPICA Y GENOTÍPICA DE CEPAS DE Frankia AISLADAS DE NÓDULOS RADICULARES DE Alnus acuminata (BETULACEAE).

CARÚ, M.; BECERRA, A.; MOSQUERA, G.; SEPÚLVEDA, D. Y CABELLO, A.

Concepción, Chile

Jornada; XXXIII Reunión Anual Sociedad Genética de Chile.; 2000

Las bacterias del género Frankia son microsimbiontes fijadores de nitrógeno que inducen la formación de nódulos radiculares en un amplio rango de angiospermas dicotiledóneas conocidas como plantas actinorrícicas Dos cepas de Frankia se aislaron a partir de nódulos de Alnus acuminata colectados en la selva Tucumano-orense, Argentina. Los cultivos monosporales se obtuvieron por germinación de esporas. Para la caracterización fenotípica las cepas se cultivaron en medio BAP a 28º C. La infectividad de las cepas fue determinada  sobre plántulas de Alnus glutinosa de 3 meses de edad inoculadas con una suspensión micelial  equivalente a 15 ug de proteínas por planta. La nodulación  y la fijación de nitrógeno se determinó 5 meses después de la inoculación. La  actividad de la nitrogenasa se cuantificó por cromatografìa de gases por el método de reducción de acetileno. Para los marcadores RAPDs y RFLP, el DNA genómico fue purificado por protocolos estándares y los productos de PCR fueron analizados en geles de agarosa al 1.2 %  o en geles de acrilamida al 8% respectivamente. Las cepas denominadas AacI y AacIII muestran un micelio ramificado con esporangios polimorficos y vesículas reductoras de nitrógeno. Ellas difieren en su capacidad para utilizar fuentes de carbono y en su resistencia a antibióticos. La actividad de nitrogenasa in vitro fue significativamente mayor en medio sin nitrógeno que en presencia de NH4Cl.  Ambas cepas fueron infectivas en plántulas de Alnus glutinosa induciendo aproximadamente un 80%  de nodulación y efectivas para la fijación de nitrógeno in planta.  El análisis de marcadores RAPDs y de RFLP para la región intergénica entre el  rDNA 16S y 23S revela que existe polimorfismo genético entre ambas cepas. El análisis de cluster UPGMA de esto marcadores moleculares las ubica como cepas derivadas de la familia Betulaceae.