Rol de citocinas y quimiocinas en la muerte de timocitos durante la infección chgásica experimental

PEREZ ANA ROSA, SILVA-BARBOSA SUSE, BERBERT LUIZ, REVELLI SILVIA, BOTTASSO OSCAR, SAVINO WILSON.

Rosario, Argentina

Congreso; XII Congreso y XXX Reunión Anual de la Sociedad de Biología de Rosario; 2010

Sociedad de Biologia de Rosario

ROL DE CITOCINAS Y QUIMIOCINAS EN LA MUERTE DE TIMOCITOS DURANTE LA INFECCIÓN CHAGÁSICA EXPERIMENTALPerez Ana Rosa1, Silva-Barbosa Suse2, Berbert Luiz2, Revelli Silvia1, Bottasso Oscar1, Savino Wilson2. perez.ana@conicet.gov.ar; perez_anarosa@yahoo.com.ar1Instituto de Inmunología, Facultad de Ciencias Médicas, UNR, Argentina. 2Laboratório de Pesquisas sobre o Timo, Fundação Oswaldo Cruz, RJ, Brasil. Durante el curso de la Enfermedad de Chagas se han descripto varios tipos de disturbios inmunológicos que involucran a las células T. En modelos experimentales murinos, una de las alteraciones más evidentes durante la etapa aguda de la infección es el desarrollo de una severa atrofia tímica causada por la muerte masiva de las células T CD4+CD8+ (DPs). En paralelo se produce también un “escape” de estas células a periferia, aún inmaduras y con potencial autoreactivo. Los procesos normales de diferenciación, muerte y migración de los timocitos están finamente regulados por citocinas, quimiocinas y/o sus receptores. Dichos procesos podrían estar alterados durante el curso de la infección chagásica por variaciones en las concentraciones de estos mediadores, ya sea a nivel intra-tímico o sistémico. En base a lo anterior, nuestro objetivo fue analizar durante el proceso infeccioso agudo el rol de distintas citocinas o sus receptores en las alteraciones de la población de células DPs, como así también su participación en la muerte de los timocitos. Para ello infectamos animales knock-outs (KO) para IFN-g, FNT-R1, CCR2, MIP-1a, IL-4, IL-10 e IL-12 (todos en background C57BL/6 -w.t.-, n=3-6/grupo) con 1.103 parásitos (cepa Y) y evaluamos al día 15 post-infección la severidad de la atrofia tímica, el fenotipo y el porcentaje de apoptosis de los timocitos por citometría de flujo (utilizando anticuerpos anti-CD3+/CD4+/CD8+ unidos a distintos  fluorocromos y AnexinaV/Ioduro de propidio respectivamente). Los animales KOs no infectados mostraban porcentajes levemente mayores de células DPs que los w.t., sin llegar a ser significativos [a modo de ejemplo: DPs (%) (media±esm) IL-12-KO: 84.2±1.7; C57BL/6 w.t.: 78.1±0.7;  p=n.s.]. Tras 15 días de infección los animales TNF-R1-KO, IFN-g-KO y los w.t. exhibían valores similares de DPs (alrededor del 25%). La disminución porcentual de células DPs fue más severa en los animales deficientes en IL-10  y MIP-1a que en los C57BL/6 w.t. [IL-10-KO: 2.0±1.3; MIP-1a-KO: 9.1±2.1; C57BL/6 w.t.: 25,2±8,2  p<0.05 vs. resto KOs]. Por el contrario, la pérdida de células DPs pareció estar inhibida cuando los animales eran deficientes en CCR2, IL-12 o IL-4 [CCR2-KO: 68.8±5.6; IL-12-KO: 90.8±5.0; IL-4-KO: 66.7±6.2; C57BL/6 w.t. 25,2±8,2  p<0.05 vs. resto KOs]. La evaluación de la apoptosis arrojó resultados similares. Estos resultados sugieren que CCR2 o MCP-1, su principal ligando, IL-12 e IL-4 estarían implicados en el desarrollo de la atrofia tímica durante la infección chagásica experimental. Financiamiento: SeCyT-UNR; Fiocruz & CNPq/ProSul (Brazil).