IMPACTO DE LA TERAPIA ANTIVIRAL EN LA LIBERACIÓN DEL GENOMA DE HCV EN CULTIVOS DE CÉLULAS MONONUCLEARES PERIFÉRICAS.

ALOISI NATALIA; BASTON MARIELA; CULASSO ANDRÉS; CORTI MARCELO; DE TEZANOS PINTO MIGUEL; PÉREZ BIANCO RAÚL; DE BRACCO MARÍA MARTA; RUIBAL ARES BEATRIZ; BARÉ PATRICIA

Hotel Sheraton, Buenos Aires, Argentina

Congreso; Congreso Argentino de Hepatología; 2009

Asociación Argentina para el estudio de enfermedades del hígado

La replicación del virus de hepatitis C (HCV) en las células mononucleares periféricas (CMP) puede tener consecuencias importantes en la transmisión viral, en la patogenia de la enfermedad y en la respuesta al tratamiento antiviral. El análisis del comportamiento del virus en estas células durante la terapia es objeto de gran interés ya que puede proveer información suplementaria y útil para identificar distintos patrones de respuesta. Por otro lado, la persistencia viral en este reservorio podría revelar una posible causa de falla en la terapia. Se evaluó la recuperación de genoma de HCV con nested RT-PCR en plasmas y sobrenadantes (SN) de cultivo de CMP de 9 pacientes coinfectados HIV/HCV, que recibieron terapia antiviral para la infección por HCV (Interferón–Ribavirina). Sus cultivos fueron analizados a lo largo de 20 días, antes, durante (12 semanas o posterior) y después de finalizados dichos tratamientos. La frecuencia de SN positivos sobre el total de los SN estudiados por cultivo es utilizada como una estimación de la carga viral presente en esas células y de la capacidad de esas variantes virales de replicar en ese sitio extrahepático. Los genotipos de plasmas y SN HCV+ de cultivo fueron analizados por técnicas de RFLP (cortes con enzimas de restricción). Se utilizó el método de Mann Whitney para las variables cuantitativas y la comparación de variables cualitativas se realizó con Chi cuadrado o test de Fisher. La frecuencia global de resultados HCV-RNA+ por paciente alcanzó una mediana de 43% (124 SN HCV+/289 SN totales; rango 19 a 71%), tomando en cuenta aquellos cultivos llevados a cabo en ausencia de tratamiento. La mediana de la frecuencia de positividad obtenida en cultivos realizados durante la terapia antiviral fue de 19.5% (34 SN HCV+/ 132 SN totales; rango 0 a 78%) y demostró ser significativamente menor que la encontrada en períodos libres de tratamiento (p=0.0008). En los pacientes 6, 15, 26 y 27, que demostraron respuestas virales sostenidas, se observaron frecuencias de SN HCV+ (durante y post-tratamiento) significativamente menores a las de aquellos individuos no respondedores o con recaídas (p= 0.009). A pesar de que se habían observado múltiples genotipos en los cultivos celulares de 6/9 pacientes, en ausencia de tratamiento, solo el genotipo 1 fue observado en los cultivos HCV+ realizados y analizados durante la aplicación de antivirales. Independientemente de la respuesta de cada individuo, la frecuencia de liberación de virus al SN de cultivo de CMP disminuyó significativamente en los cultivos celulares de pacientes bajo terapia antiviral. Esto indicaría que estos sitios extrahepáticos responden a los efectos del tratamiento y que éste colaboraría con la erradicación viral en este reservorio. Similar a lo observado en plasma, las variantes linfotrópicas del genotipo 1 fueron más resistentes a los antivirales, permaneciendo detectables a pesar de la desaparición de los otros genotipos.