Evolución de las regiones E2, NS5A de hepatitis C y V3 del virus de la inmunodeficiencia humana en un paciente coinfectado que no responde a la terapia antirretroviral

GARCÍA GABRIEL; CULASSO ANDRÉS; ALOISI NATALIA; BARÉ PATRICIA; CAMPOS RODOLFO

Buenos Aires

Congreso; IX Congreso Argentino de Virología 2008; 2008

Sociedad Argentina de Virología- Asociación Argentina de Microbiología

 En individuos con hemofilia, es común la coinfección con los virus de hepatitis C (HCV) y de la inmunodeficiencia humana (HIV). En ellos se ha observado una mayor carga viral de HCV y daño hepático que en los individuos infectados solo con HCV. Debido a que es limitado el conocimiento de la evolución viral en estos individuos, el objetivo de este trabajo fue estudiar en un paciente hemofílico, cómo afectó el tratamiento antiretroviral de alta eficacia (HAART) la evolución molecular de ambos virus.Para lo cual, se analizaron los cambios de las poblaciones virales en las regiones más variables de ambos virus, cuya evolución se asocia con la respuesta inmune (HVR-1,2 y 3 para HCV y V3 en HIV). También se estudio la región NS5a (HCV), que presenta una evolución independiente de la misma. El análisis de las poblaciones virales se realizó comparando por períodos, las secuencias directas obtenidas de cada región, amplificadas del plasma del paciente. Para HCV se analizaron 7 períodos (P), los valores entre paréntesis indican el año en que se tomó cada muestra de plasma y el intervalo de tiempo entre ellas: P1 (1992-97: 2044 días), P2 (1997-98: 312 días), P3 (1998-01: 1139 días), P4 (2001-02: 298 días), P5(2002-03: 224 días), P6 (2003-04: 324 días) y P7 (2004-07: 1063 días). Excepto P1 y P2, los restantes períodos se analizaron también en HIV. Este paciente inició una terapia con HAART, 7 meses antes del comienzo de P2 y finalizó con la muestra final (2004) de P6. El valor promedio de las cargas virales fue de 12589 (1659 - 63095) copias/ml. Cómo medida de la variación genética viral, se calculó la distancia genética (Kimura-2 parámetros) determinando el número de cambios por sitio por año (c.s.a) en cada período. En el inicio del tratamiento (P2), el valor obtenido fue de 2,33 x 10-3 c.s.a, el cual aumentó progresivamente en cada intervalo sucesivo, para llegar a su valor máximo en P6 (27,2 x 10-3 c.s.a). Esta tasa de evolución disminuyó en el período siguiente (P7, sin tratamiento) a 8.2 x 10-3 . Un resultado similar se obtuvo con la región V3 de HIV: el valor obtenido en P3 (3.97 x 10-3 c.s.a) se incremento hasta llegar al máximo en P6 (38.9 x 10-3 c.s.a.), para disminuir en P7 (12.9 x 10-3 c.s.a.) En cambio, la región NS5A (HCV), presentó una evolución distinta: la tasa en P2 (7.95 x 10-3 c.s.a.) fue similar a la observada en P6 (9.12 x 10-3 c.s.a.), con fluctuaciones en los valores hallados en los restantes intervalos. Además, los cambios de aminoácidos en E2 y V3 estuvieron localizados en epitopes previamente descriptos. Los valores de células CD4, se utilizaron cómo indicador de la respuesta inmune existente. En el inicio de P2, su recuento presentó los valores mínimos (212-222 células /ul), que se incrementaron hasta llegar a un máximo de 818 células/ul, luego de 8 meses de finalizado el tratamiento. Este valor disminuyo luego a 261 células/ul, tres meses después de finalizado P7. En síntesis, durante el tratamiento de HIV con HAART, se observó un aumento progresivo de la tasa de evolución genética tanto para E2 como para V3 asociado al nivel creciente de las células CD4. Además los cambios no sinónimos se localizaron en epitopes previamente descriptos. Al finalizar el tratamiento, disminuyó el número de células CD4 y la tasa de evolución genética de ambos virus. En cambio, la región de NS5a no parece evolucionar asociada a la respuesta inmune. Los resultados obtenidos sugieren que durante el tratamiento, el aumento sucesivo en los niveles de células CD4 y por ende de la respuesta inmune del paciente, se corresponde con una respuesta viral característica de un proceso de activa diversificación genética.