Evolución de la Región Hipervariable 1 de la proteína E2 del virus de hepatitis C en pacientes crónicamente infectados

ALFONSO VICTORIA; MBAYED VIVIANA; KOTT VERÓNICA LAURA; FLICHMAN DIEGO MARTÍN; SOOKOIAN SILVIA; CAMPOS RODOLFO

Ciudad Autónoma de Buenos Aires

Encuentro; XX Reunión Científica Anual de la Sociedad Argentina de Virología.; 2000

Sociedad Argentina de Virología

La infección crónica con el virus de la hepatitis C (HCV) está asociada a severas patologías (cirrosis, hepatocarcinoma). El mecanismo por el cual el HCV persiste en el hospedador, está parcialmente relacionado con una continua evolución de sus glicoproteínas de envoltura. La región hipervariable 1 (HVR1) de la proteína de envoltura E2 al estar sometida a presión selectiva por anticuerpos neutralizantes participa activamente de este proceso. Para el estudio de la evolución de dicha región se estudia su comportamiento en pacientes crónicamente infectados, tratados con interferón . Se analizaron muestras de dos pacientes (1: no respondedor NR y 2: respondedor transitorio RT) tomadas antes, después y luego de doce meses de la finalización del tratamiento. En ambos pacientes, en cada muestra, la región HVR1 fue amplificada por RT-PCR y cada amplificado fue secuenciado (consenso) y clonado. Los clones fueron analizados por SSCP y ocasionalmente secuenciados en sus regiones HVR1.Los resultados muestran que en los dos pacientes las secuencias de los diferentes clones se corresponden con la secuenciación directa de las muestras. En el paciente 1 (NR) se observa que la existencia de bases nucleotídicas mixtas en la secuenciación directa (consenso) refleja los diferentes nucleótidos presentes en las cuasiespecies, pero tanto la secuencia consenso como las proporciones entre los clones analizados no se modifican sustancialmente luego del tratamiento. En cambio, en el paciente 2 (RT) luego del tratamiento, se encuentra una importante cantidad de cambios nucleotídicos (15 de 90), en su mayoría no sinónimos (12 de 15), lo que muestra la importante presión selectiva ejercida. Luego del tratamiento (doce meses después) se observa un número menor de cambios (3 de 90, siendo todos no sinónimos). Es importante destacar además que dos de estos cambios son reversiones a la secuencia previa al tratamiento. La respuesta de la HVR1 al tratamiento es claramente diferente entre ambos pacientes. Mientras en el paciente NR el mismo no altera la evolución de la HVR1, en el paciente RT la evolución de esta región no es compatible con una selección sucesiva y acumulativa de mutaciones, sino producto de la selección de cuasiespecies totalmente diferentes (12 aminoácidos modificados sobre un total de 30 de la HVR1) y presentes en baja proporción.