Estudio evolutivo del gen E2 del virus de la hepatitis C en la infección crónica.

ALFONSO VICTORIA; SOOKOIAN SILVIA; CAMPOS RODOLFO

Tandil, Buenos Aires, Argentina.

Jornada; XXIII Reunión Científica Anual de la Sociedad Argentina de Virología; 2003

Sociedad Argentina de Virología

El virus de la hepatitis C (HCV) es el principal agente causal de hepatopatía crónica severa. El HCV circula como cuasiespecies en el individuo infectado. La respuesta inmune del hospedador ejerce una fuerte presión selectiva sobre las proteínas de la envoltura viral. El gen de la glicoproteína de envoltura E2 posee la región más variable de todo el genoma (HVR1). En un estudio previo de la evolución de HVR1 durante 29 meses, en pacientes con infección crónica tratados con interferón (IFN) se puso en evidencia que la evolución se daba principalmente por un mecanismo de shift de las poblaciones virales. Objetivo: Estudiar la dinámica evolutiva poblacional de una región del gen E2 de HCV en dos pacientes (p1 y p7) con infección persistente, sometidos a tratamientos con IFN e IFN-ribavirina. Metodología: Se estudiaron 5 sueros tomados a distintos tiempos de la infección. Se extrajo el ARN y se amplificó un fragmento que abarca la HVR1, la HVR2 y regiones conservadas. Los amplicones fueron clonados en vectores plasmídicos y los clones fueron secuenciados. Resultados: El estudio filogenético y de las secuencias de aminoácidos de todos los tiempos muestran una dinámica evolutiva de cuasiespecies. En p7 se ven agrupamientos muy definidos en cada tiempo, donde se visualiza la selección de subpoblaciones previas minoritarias. En p1 los clones de cada tiempo no forman grupos definidos, sin embargo se puede observar cómo con los tratamientos se selecciona un linaje de secuencias. Si se analiza sólo la HVR1 se ve de forma más clara el proceso de selección. En p7 los linajes pertenecientes a cada tiempo son homogéneos en esta región. En p1 la HVR1 es altamente homogénea luego de haber terminado con los tratamientos. Conclusiones: El análisis evolutivo de una región de E2 en dos pacientes, muestra, nuevamente, un proceso de selección continua de subpoblaciones (shift) que coexisten con otras muy diferentes, presentes en distinta proporción. Resulta notorio que la región genómica viral (HVR1) que presenta la mayor diversidad genética entre diferentes muestras presente una gran estabilidad intrapoblacional. Estos resultados sugieren que la selección se ejercería sobre una región más que sobre mutaciones puntuales. Además la homogeneidad observada en el fenotipo también se ve en las secuencias nucleotídicas, indicando que la presión también actuaría en este nivel.