CONICET | Buscador de Institutos y Recursos Humanos

La tribu Naupactini contiene más de 500 especies distribuidas principalmente en Centro y Sudamérica. EnArgentina, ejemplares de los géneros Naupactus y Pantomorus afectan diversos cultivos causandopérdidas económicas debido al daño ocasionado en hojas y raíces. Algunas especies de este grupo sereproducen partenogenéticamente (e.g. N. cervinus, P. postfasciatus). Este modo reproductivo guardauna relación causal con la bacteria intracelular obligada Wolbachia pipientis, que es capaz de induciralteraciones reproductivas en sus hospedadores. Un experimento de cura con antibióticos sugirió laexistencia de un umbral en la carga bacteriana que determinaría la inducción del fenotipopartenogenético. Esta hipótesis fue contrastada mediante ensayos con PCR en tiempo real paracuantificar la carga bacteriana. Al utilizar un individuo de una especie de reproducción sexual como control negativo se detectó una carga bacteriana baja. El objetivo de este trabajo es relevar la presencia de Wolbachia en distintas poblaciones de dos especies de reproducción sexual muy frecuentes de la tribuNaupactini, N. xanthographus y N. dissimulator.Se analizaron machos y hembras de 14 poblaciones de N. xanthographus y 8 poblaciones de N.dissimulator de distintas regiones de Argentina y Brasil. Se realizó la extracción de ADN y las amplificaciones de regiones específicas de Wolbachia y para la secuencia 16SrDNA utilizando cebadores universales para Eubacterias. Además, se realizó la cuantificación de los niveles de Wolbachia mediante PCR en tiempo real y la tipificación de las cepas mediante clonado y secuenciación utilizando el sistema de tipificación estándar para Wolbachia. Los resultados de PCR convencional mostraron que 7/8 poblaciones de N. dissimulator y 8/14 poblaciones de N. xanthographus se encuentran infectadas con Wolbachia. En todos los casos, la banda observada en el gel de agarosa fue muy tenue. La cepa fue identificada como wNau1, la misma que induce partenogénesis en P. postfasciatus. La baja concentración de Wolbachia fue confirmada por PCR en tiempo real, detectándose una diferencia de 10 Ct entre las especies sexuales y las partenogenéticas (N. cervinus y P. postfasciatus). Finalmente, la amplificación del fragmento bacteriano 16SrDNA reveló la presencia de una banda intensa para ambas especies sexuales, que podría corresponder a otra/s bacteria/s. Estos resultados refuerzan la hipótesis de la existencia de una carga bacteriana mínima necesaria para inducir el fenotipo partenogenético (umbral). Además, sugiere la presencia de otras bacterias en especies sexuales que compiten con Wolbachia, manteniéndola en niveles bajos. Futuros estudios desecuenciación masiva del fragmento 16SrDNA permitirán comprobar estas hipótesis.