Método de descamación en alas de mosquitos (Diptera: Culicidae) para el estudio de la morfometría geométrica

IRIS ALEM; NICOLÁS SCHWEIGMANN; AGUSTINA BERIOTTO; MAXIMILIANO GARZÓN

Mar del Plata, Buenos Aires, Argentina

Jornada; X Jornadas Regionales Sobre Mosquitos; 2016

Centro Científico Tecnológico Mar del Plata (CCT ? CONICET ? Mar del Plata).

Una de las dificultades para trabajar con morfometría geométrica en alas de culícidos es la presencia de escamas que dificultan la observación y marcación de puntos de referencias o Landmarks (LMs) representados por las intersecciones entre las nervaduras. Las imprecisiones producto de la subjetividad de cada operador encargado de asignar los LMs pueden generar errores en los análisis filogenéticos. Para resolver el problema existen diversas técnicas de descamado que pueden ser más o menos riesgosas (trabajo bajo campana de baños en KOH, etanol, etc.) o complicadas en cuanto a la manipulación de montaje de una estructura tan frágil y delicada como es el ala.El objetivo de este trabajo es presentar una técnica simple (en seco) para eliminar las escamas del ala y comparar la precisión en la colocación de LM efectuada por cuatro operadores sobre 30 imágenes (réplicas) de un ala (antes y después del descamado). Latécnica de descamado consistió en una secuencia de tres traspasos de las caras del ala por superficies con distinta pegajosidad de menor a mayor adherencia. En el primer paso, una de las caras del ala fue extendida totalmente sobre una superficie de baja pegajosidad. Luego, la otra cara fue adherida, presionando levemente, sobre la otra superficie de adherencia media. De esta manera quedaron adheridas: las escamas en la 1era superficie (menor adherencia), y la totalidad del ala a la segunda superficie (adherencia media). Desde el borde cercano alápice del ala, la hoja de menor adherencia se despegó cuidadosamente en sentido hacia la base. Luego, se adhirió una superficie de máxima pegajosidad (superficie definitiva) sobre la cara del ala recientemente descamada y se procedió a despegar la superficie de adhesividad media del mismo modo que en el segundo paso. El ala fue fotografiada antes y después de aplicar esta técnica. En las imágenes digitales de las alas (con y sin escamas) se asignaron 13 LMs mediante el software Tps-DIG 2.16. Luego se aplicó el algoritmo de ProcrustesGeneralizado para obtener las variables de la conformación (shape) del ala para cada grupo de repeticiones. La distribución de los datos se analizó mediante un Análisis de Componente Principales (ACP) en base a los shapes. El conjunto de observaciones de LMs con escamas resultó Independiente del conjunto sin escamas. Además hubo una disminución de la variabilidad de cada operador al colocar los LMs en ausencia de escamas. El Análisis de Conglomerados demostró cuatro clusters que correspondieron a los cuatro operadores para las observacionesdel ala con escamas y un solo agrupamiento que reunió a todos los operadores para los LMs sobre el ala descamada (criterio de corte 50% de máxima distancia).El descamado minimiza el error cometido por los operadores al colocar los LMs en las intersecciones de las nervaduras. Se puede interpretar que las diferencias entre grupos de ejemplares dentro la misma población se maximizaría al eliminar las escamas. Por otra parte, la metodología de la pegajosidad en seco resultó ser efectiva para descamar las alas, donde logró mejorarse la precisión del análisis con una manipulación más segura tanto para el operador como para el material de estudio.