Zarigüeyas (Didelphis albiventris) como principales reservorios silvestres de Trypanosoma cruzi I en Argentina.

OROZCO MM; ARGIBAY HD; ENRIQUEZ GF,; CARDINAL MV; GURTLER RE

CABA

Congreso; II Congreso de la Sociedad Iberoamericana de Epidemiología Veterinaria y Medicina Preventina; 2014

Trypanosoma cruzi, agente etiológico de la enfermedad de Chagas, presenta una amplia diversidad genética y fue clasificado en seis Unidades Discretas de Tipificación (UDT) (TcI a TcVI). Las UDT se distribuyen diferencialmente entre las diversas especies de triatominos, hospedadores vertebrados y hábitats en distintas áreas geográficas. TcI fue originalmente descripto en ciclos silvestres en Brasil y en todo el continente americano incluyendo el Gran Chaco, siendo identificado principalmente en zarigüeyas Didelphis albiventris y otros mamíferos arborícolas. También se lo describe actualmente como agente etiológico principal de la enfermedad humana en áreas endémicas al norte del Amazonas. Con el objetivo de evaluar y comparar el rol de las zarigüeyas en los ciclos de transmisión de T. cruzi en áreas con transmisión vectorial doméstica activa e interrumpida, y evaluar su competencia como reservorios en ambas áreas, se llevó a cabo un estudio en las provincias de Chaco y Misiones, entre 2008 y 2014. Las zarigüeyas fueron capturadas utilizando trampas tipo National y posteriormente inmovilizadas con anestesia parenteral y/o inhalatoria. Todos los animales fueron sexados y pesados, se les extrajo una muestra de sangre y se les realizó xenodiagnóstico (XD) utilizando 20 ninfas de Triatoma infestans de IV estadio, colocadas durante 25 min sobre cada zarigüeya en zonas de piel fina contenidos en cajitas de madera. El contenido rectal de los triatominos se examinó individualmente a través de un microscopio óptico (MO) (Carl Zeiss, 400X) a los 30 y 60 días post-exposición. A partir de las heces de los triatominos positivos se realizó el aislamiento y cultivo de los parásitos en un medio bifásico (28°C; 50% humedad) y luego los parásitos fueron criopreservados. El diagnóstico molecular se realizó utilizando PCR dirigidas al DNA del kinetoplasto parasitario (kDNA-PCR) y al DNA nuclear (Sat-DNA-PCR) y como molde, DNA extraído desde muestras de sangre y/o de la ampolla rectal de los triatominos utilizados en los XD. Las UDT se identificaron mediante estrategias de PCR dirigidas a la secuencia líder o ?mini-exón? (SL-IRac, SL-IRII, SL-IRI) y al 24s alfa rDNA a partir de DNA extraído desde muestras de cultivo de cada animal. La infectividad de las zarigüeyas al vector fue calculada como el número de T. infestans positivas para T. cruzi por MO dividido por el total de insectos expuestos sobre el hospedador y examinados al menos una vez. Se capturaron y estudiaron 57 D. albiventris en Chaco y 45 en Misiones. En Chaco se obtuvo una prevalencia de infección del 33% (IC95% = 22 46%), correspondiente a 11 animales positivos por XD y PCR, 1 animal positivo solo por XD y 7 animales positivos solo por PCR. La infectividad al vector fue del 47%. En Misiones, la prevalencia de infección fue del 20% (IC95% = 11 34%) correspondiente a 9 animales positivos por XD y PCR, con una infectividad al vector del 66%. En todas las zarigüeyas positivas se identificó al TcI ya que presentaron una banda de 150 pb para la secuencia líder SL-IRac (cebadores UTCC/TCAc) y una banda de 475 pb para la secuencia líder SL-IRI (cebadores UTCC/TC2). Estos resultados soportan el rol de D. albiventris como reservorio de T. cruzi en ambientes silvestres, participando en un activo ciclo de transmisión de TcI que ocurre tanto en áreas donde la transmisión vectorial doméstica está presente (Chaco) como en zonas donde se halla interrumpida (Misiones).