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El agente etiológico de la Enfermedad de Chagas, Trypanosoma cruzi, es un hemoparásito de fácil cultivo in vitro. Sin embargo, el aislamiento de parásitos a partir de pacientes crónicos de áreas rurales ha resultado clásicamente una tarea dificultosa no sólo debido a la baja parasitemia propia de esta fase de la enfermedad, sino también a la dificultad de contar con el equipamiento necesario en estudios a campo. Con el objetivo de obtener aislados de T. cruzi de pacientes residentes del área rural del Municipio de Pampa del Indio realizamos xenodiagnósticos artificiales con posterior cultivo del parásito a partir de las heces de las vinchucas infectadas. Se seleccionaron 13 pacientes entre 7 y 18 años, que resultaron seropositivos y estaban en condiciones de iniciar el tratamiento etiológico. Se los consideró pacientes crónicos ya que el área de estudio hacía 4 años que se encontraba bajo vigilancia vectorial. Se tomó hasta 5 ml de sangre heparinizada de cada paciente, la cual fue inmediatamente ofrecida a los triatominos a través de una membrana de profiláctico utilizando un alimentador artificial. Para cada paciente se utilizaron 2 tacos de madera cada uno conteniendo 10 Triatoma infestans de IV estadío hambreados, las cuales se alimentaron durante 20 minutos. A los 30 y 60 días post ingesta se estudió la infección de los triatominos examinando las heces al microscopio óptico y a partir de los positivos, se realizaron cultivos con medio bifásico (BHI enriquecido con SFB y base de agar-sangre). El 69,2% (n=13) de los pacientes tuvo al menos 1 triatomino infectado. La infectividad promedio fue del 14,7% (IC95=10,4-19,7). Se logró aislar y criopreservar el parásito en todos los pacientes con xenodiagnóstico positivo. La relevancia de este trabajo radica en la elevada eficacia obtenida con este método, posibilitando la obtención de aislados de T. cruzi de pacientes en una zona rural.