Inactivación de señales de quorum sensing bacteriano por aislamientos rizosféricos de Trichoderma spp.

TORRES MARIELA ANALÍA; LEGUINA, ANA CAROLINA DEL V.; BERTINI, ELISA VIOLETA; CASTELLANOS DE FIGUEROA, LUCÍA I.; FERNÁNDEZ PABLO MARCELO; PAJOT, HIPÓLITO F.; CARLOS G. NIETO PEÑALVER

Congreso; XV Congreso Argentino de Microbiología - CAM 2019; 2019

Los sistemas de {quorum sensing}permiten a los microorganismos regular su fisiología de forma coordinadamediante señales químicas. En muchas bacterias Gram negativas, estas señalesquímicas son N-acil homoserina lactonas (AHLs). Estas moléculas son a la vezsusceptibles de inactivarse por enzimas producidas por otros microorganismos,un fenómeno denominado quorum quenching (QQ). La inactivación reversible de lasAHLs la realizan las enzimas lactonasas, que abren el anillo lactónico dandocomo producto la acil homoserina correspondiente. En general, la inactivaciónirreversible la producen las enzimas acilasas/amidasas, que rompen el enlaceamida de la AHL produciendo la homoserina lactona y el ácido graso. Aunque muycaracterizadas en bacterias, estas enzimas han sido poco estudiadas en hongosfilamentosos, a pesar de que coexisten con bacterias productoras de AHLs enmuchos ambientes. El objetivo de este trabajo fue la caracterización de laactividad QQ en aislamientos de Trichoderma spp. aislados de la rizósfera deplantas de tomate. Trichoderma es un género de gran importancia agronómica porsus efectos positivos sobre el crecimiento vegetal. A partir de raíces deplantas de tomate (var. Elpida) de una plantación comercial en Lules (Tucumán)se obtuvieron dos aislamientos de Trichoderma spp. en medio de cultivo PDAsuplementado con rosa bengala. Los aislamientos se cultivaron en caldos YM, LBy King´s B suplementados de forma independiente con N-hexanoil homoserinalactona (C6-HSL) y N-dodecanoil homoserina lactona (C12-HSL). Se determinaronlas AHLs residuales mediante bioensayos con Chromobacterium violaceum CV026 yVIR07, dos cepas indicadoras de AHLs de cadena corta y cadena larga,respectivamente. Estos ensayos permitieron confirmar que los aislados de Trichodermaspp. son capaces de inactivar completamente C6-HSL y C12-HSL luego de 48 y 72 hde incubación, respectivamente. Mediante ensayos de acidificación, se comprobóque la inactivación de dichas moléculas es irreversible, lo que sugiere que laruptura se encuentra en el enlace amida. También se determinó que la actividadQQ es constitutiva y extracelular, conservando su actividad en ausencia delmicroorganismo. El tratamiento de los sobrenadantes de Trichoderma spp. concalor y con proteinasa K sugiere que las actividades QQ sobre C6-HSL y sobreC12-HSL son independientes, y que al menos la actividad QQ sobre C12-HSL es de naturalezaproteica. Los resultados encontrados muestran por primera vez la presencia deactividad QQ en Trichoderma spp. Esto sugiere una nueva característicaecológica para este microorganismo, el que podría afectar la comunicación microbianaen la rizósfera de la planta de tomate. Por otra parte, la característicaextracelular de la actividad enzimática QQ tiene un interés biotecnológicoadicional para continuar con su estudio, ya que generalmente esta esintracelular.