Estudio de la tolerancia cromo, cadmio y cobre con levaduras endofíticas de caña de azúcar

ANAHÍ BERNAL; ELÍAS CRUZ; CARLOS G. NIETO PEÑALVER; PABLO M. FERNANDEZ; CASTELLANOS DE FIGUEROA, LUCÍA I.

Rosario

Congreso; XXIII Congreso Latinoamericano de Microbiología; 2016

Los metales pesados como el cromo [Cr(VI)], cadmio [Cd(II)] y cobre [Cu(II)], se ubican entre los más peligrosos debido a que no pueden serquímica ni biológicamente degradados. La biorremediación de estos contaminantes implica la selección de cepas tolerantes y/o resistentescapaces de removerlos del medio ambiente empleando técnicas ecológicamente amigables.Por este motivo el objetivo del trabajo es estudiar la tolerancia de levaduras endofíticas de la caña de azúcar a distintos metales pesados.Se trabajó con 2 cepas de levaduras endofíticas, Pichia sp. 6N y Rhodotorula sp. 7Apo1. Se estudió la tolerancia a Cu(II), Cd(II) y Cr(VI) en placascon medio YM e YNB con concentraciones entre 0,25 y 10 mM de cada metal. Las condiciones de incubación fueron a 25ºC durante 96 h.También se evaluó la tolerancia a los metales en cultivos líquidos (concentraciones de 0,25 ? 1 mM de Cr(VI) y Cd(II) y de 0,25 ? 10 de Cu(II)),por separado y en mezclas. Estos ensayos se realizaron en agitación (250 rpm) durante 96 h a 25°C. El crecimiento de las levaduras (medida dela turbidez del cultivo a 600 nm) se tomó como parámetro de tolerancia.En placas, Pichia sp. 6N toleró hasta 10 mM de Cu(II) en medio YM, mientras que en medio YNB con Cr(VI) y Cd(II) lo hizo hasta 5 y 1,5 mMrespectivamente. Tanto en medio YM e YNB, Rhodotorula sp. 7Apo1 presentó crecimiento abundante en placas con 10 mM de Cd(II) y Cu(II) coninhibición del crecimiento a concentraciones superiores a 0,75 mM de Cr(VI). En medio líquido YM con Cr(VI) 1 mM, la cepa 6N alcanzó el doblede DO comparado al crecimiento en medio YNB. Con la levadura 7Apo1 el crecimiento fue escaso a concentraciones superiores a 0,25mM deCr(VI), en ambos medios. Del mismo modo, el crecimiento de ambas levaduras fue afectado por la presencia de Cd(II) 1mM, tanto en medio YMcomo en YNB. Los ensayos con cobre demostraron que las cepas presentan tolerancia hasta 5mM. Para la cepa 6N, en la mezcla Cr(VI) 1mM/Cu(II) 0,5 mM se observó estimulación del crecimiento en comparación a la lectura obtenida con cromo a idéntica concentración. Similarrespuesta se obtuvo al suplementar Cu(II) 0,5 mM al medio con Cd(II) 1 mM ya que el crecimiento de la cepa 7Apo1 se triplicó. Contrariamente,la levadura 6N presentó menor crecimiento en iguales condiciones.Se observó que las cepas endofíticas de caña de azúcar son tolerantes a concentraciones elevadas de metales pesados a pesar de haber sidoaisladas de sitios no contaminados. Del mismo modo, la mezcla de contaminantes con Cu(II) 0,5 mM tiene un efecto positivo en el crecimientode las levaduras. Estos resultados nos permitirán continuar con el estudio de la bioquímica de las levaduras a fin de poder desarrollartecnologías de biorremediación más eficaces a las demandas locales.