Conformación de un banco de material genético proveniente de carpa común orientado al monitoreo del estado sanitario de especies ictícolas de interés para la industria alimentaria

DE MAIO, FEDERICO ANDRÉS; SORICETTI, MARIANO; GUARDIOLA RIVAS, FREDY JOSE; SOLIMANO, PATRICIO; BARRIO, DANIEL ALEJANDRO; BELLUSCI, CAROLINA PAULA

Ciudad Autónoma de Buenos Aires

Congreso; XVII Congreso Argentino de Ciencia y Tecnología de Alimentos y XXI Congreso Latinoamericano y del Caribe de Ciencia y Tecnología de Alimentos (CyTAL - ALACCTA 2019); 2019

Introducción: La carpa común (Cyprinus carpio) es la especie de agua dulce más ampliamente distribuida en el mundo y habría sido introducida en Argentina hacia fines del siglo XIX, considerándosela como una especie exótica invasora por su alta capacidad de dispersión en diversos ambientes. Asimismo, no sólo en nuestro país sino también a nivel mundial, ha ido adquiriendo una creciente importancia en términos de su potencial para la industria alimentaria, con producción por explotación pesquera y también por prácticas acuícolas. Es destinada tanto al consumo humano como a la nutrición animal. Ante la necesidad de elaborar estrategias para una explotación sustentable de este recurso, surge el interés por estudiar aquellos factores que pudieran afectar su producción, particularmente las enfermedades infecciosas.Objetivo: Establecer un banco de material genético proveniente de carpa común orientado a la realización de estudios epidemiológicos mediante ensayos de reacción en cadena de la polimerasa (PCR).Materiales y métodos: A partir de muestreos efectuados durante 2016 y 2017 en múltiples sitios del curso inferior del río Negro, se obtuvieron porciones de intestino posterior, branquias y cerebro de carpa. Los tejidos fueron conservados separadamente a -20°C hasta ser disgregados y procesados como pool de órganos, utilizándose 25-30 miligramos para la extracción de ADN total. Alícuotas del ADN purificado fueron sometidas a corridas electroforéticas en geles de agarosa 1% para analizar su integridad y estimar su concentración. El material genético extraído se utilizó en un ensayo de PCR de punto final diseñado para amplificar un segmento de 607 pb del genoma de carpa (gen de la glucoquinasa). Los productos de amplificación se corrieron en geles de agarosa 2% junto con un marcador de peso molecular. Los geles fueron preparados con buffer TAE y GelRed para visualizarlos en transiluminador UV.Resultados: Se extrajo el material genético de tejidos provenientes de 102 ejemplares de carpa. En la mayoría de los casos se logró una purificación de ADN total con predominancia de fragmentos de alto peso molecular. Para evaluar la calidad de dicho material genético en términos de su aptitud como molde para la técnica de PCR, se optimizó un ensayo control dirigido contra el genoma de carpa. Las muestras de ADN rindieron un producto de amplificación del tamaño esperado (aproximadamente 600 pb) en 79 de las 102 determinaciones efectuadas, indicando una prueba exitosa para casi el 78% de los casos. Con estos ADN de calidad verificada se inició la conformación de un banco de material genético de fauna silvestre. Para su conservación a largo plazo, este material fue almacenado a -70°C.Discusión: El procedimiento descripto sienta las bases para el desarrollo de un banco de material genético constituido con ADN total proveniente de diferentes órganos de carpa. Este banco, junto con la implementación de técnicas para la detección molecular de patógenos, posibilitará la concreción de estudios tanto prospectivos como retrospectivos que brindarán información valiosa para el manejo de este recurso pesquero. Actualmente están en curso proyectos para determinar la presencia, en carpas del noreste patagónico, de distintos agentes virales y bacterianos.