La proteína NS5 del virus del dengue altera el splicing celular

GEBHARD LEOPOLDO; GONZALEZ LOPEZ LEDESMA M; IGLESIAS NÉSTOR GABRIEL; DE MAIO FEDERICO; POZZI BERTA; ISERTE J; YANOVSKY MARCELO; SREBROW ANABELLA; GAMARNIK ANDREA

Buenos Aires

Congreso; XII Congreso Argentino de Virología (CAV); 2017

Sociedad Argentina de Virología (SAV)

Para replicar eficientemente, los virus deben crear condiciones celularesfavorables y superar la respuesta antiviral innata. El virus de dengue(DENV) es un virus de (+)ARN, perteneciente a la familia Flaviviridae, delgénero Flavivirus. Este virus se encuentra filogenéticamente relacionadocon otros patógenos humanos como el virus de la fiebre amarilla (YFV) yel virus del Zika (ZIKV). La proteína NS5 de los flavivirus juega múltiplesfunción durante la infección viral: es responsable de la replicación delARN viral así como de contrarrestar la respuesta antiviral delhospedador. Con el fin de investigar la interacción de NS5 concomponentes celulares, se realizaron estudios de proteómica porespectrometría de masa. Así identificamos decenas de proteínascelulares que interaccionan con la proteína NS5 en células infectadas.Entre los interactores de NS5 se encontraron componentes de lamaquinaria de splicing; en particular proteínas que forman parte delcomplejo U5 snRNP. Estudios de silenciamiento de los factores desplicing mencionados, resultaron en un aumento significativo de lareplicación viral, indicando la relevancia de las interacciones entre NS5 ylos componentes del complejo U5. Asimismo, se pudo determinar que laproteína NS5 sola o en el contexto de una infección es capaz de afectarel splicing celular.Con el fin de estudiar la relevancia de estas observaciones, se analizó elimpacto global de la infección viral sobre el splicing celular evaluandotranscriptomas obtenidos de células infectadas y no infectadas. Esteestudio reveló cambios de splicing en cientos de transcriptos incluyendoaumento en la retención de intrones y eventos de splicing alternativo.Debido a que durante la infección viral se activa una respuesta antiviralinnata y el interferón aumenta la expresión de factores antivirales (ISGs),incluyendo cambios de splicing en ciertos casos, se realizó un análisissobre los cambios de splicing asociados a la infección viral quecontrarresten el efecto del IFN. Los resultados revelaron cambios desplicing en al menos 30 ISGs durante la infección que podrían disminuirla respuesta antiviral. Estos estudios nos permiten proponer que el virusinteracciona con la maquinaria de splicing celular para modular larespuesta antiviral y generar un ambiente favorable para su replicación.