Mutaciones de resistencia a drogas antirretrovirales en niños HIV-1 infectados

DE MAIO, FEDERICO ANDRÉS; AULICINO, PAULA; MANGANO, ANDREA; ROCCO, CARLOS; SEN, LUISA

Vaquerías, Córdoba

Jornada; XXVI Reunión Científica Anual; 2006

Sociedad Argentina de Virología

Variantes de HIV-1 con mutaciones asociadas con resistencia a las drogas antirretrovirales (ARVs) pueden ser encontradas tanto en individuos tratados como en no tratados. En estos últimos, la presencia de las mutaciones podría deberse a la transmisión de virus expuestos a las drogas o bien a la existencia de tales cambios aminoacídicos como parte de la variabilidad natural del virus.El objetivo del trabajo fue investigar sobre la presencia de mutaciones de resistencia a los ARVs en las regiones de proteasa (PR) y retrotranscriptasa (RT) del gen pol de HIV-1 de niños infectados por transmisión vertical, nacidos antes y después de la instauración de la terapia HAART y que han recibido distintos tratamientos. Se analizó el provirus de 25 pacientes, de los cuales 11 fueron naive de drogas. Los restantes recibieron inhibidores núcleosídicos de RT (NRTIs) y en 4 casos también inhibidores no nucleosídicos de RT (NNRTIs). Ningún paciente recibió inhibidores de PR (PIs). Nueve de los pacientes incluidos en el estudio nacieron previamente a la implementación de los PIs y NNRTIs en la terapia ARV. Se extrajo ADN de células mononucleares totales y se amplificó por PCR anidada una región de HIV-1 conteniendo los 99 codones de PR y hasta el codón 220 de RT. A partir de los productos de PCR, se obtuvieron las secuencias directas que luego fueron analizadas para la búsqueda de mutaciones de resistencia (empleando el Genotypic Resistance Interpretation Algorithm de la Universidad de Stanford) y la asignación de subtipo (por bootscan y nucleótidos signatura). De las 25 muestras analizadas, 4 pertenecen al subtipo B y 21 a formas recombinantes BF. No se detectaron mutaciones primarias de resistencia a PIs en las secuencias analizadas. Sin embargo, a pesar de que ninguno de los niños recibió este tipo de drogas, se encontraron en PR mutaciones secundarias en las posiciones 10, 20, 36, 63, 71, 77 y 93. Las más frecuentes en los virus recombinantes BF fueron L10I/V, K20R/M, M36I y L63noL en región F e I93L en región B. Estas mutaciones se observaron tanto en los pacientes nacidos antes como en los nacidos después de la implementación de los PIs en la terapia ARV. En cuanto a RT, mutaciones de resistencia se detectaron solamente en los virus de niños tratados. Los cambios aminoacídicos asociados con resistencia a NRTIs que se encontraron fueron M41L, E44D, D67N, T69D, V118I, M184I, L210W y T215Y/I. En 2 de los 4 pacientes que recibieron NNRTIs, se observaron las mutaciones K103N y V106A de resistencia a estos compuestos. Los resultados obtenidos para PR indican que las frecuencias observadas para distintas mutaciones secundarias en los HIV-1 recombinantes BF, no serían producto de la presión selectiva del tratamiento con PIs, sino que se tratarían de polimorfismos naturales cuya contribución al fenotipo de resistencia a drogas se desconoce. En RT la situación parece ser diferente, siendo muy inusuales las mutaciones de resistencia en los pacientes que no han recibido ARVs.