La melatonina induce la vía apoptótica mitocondrial en células C6 de glioma de rata. Implicancias terapéuticas

SAPIENZA, C.E;; ALAIMO A.; GOROJOD R.; KOTLER M.L.

Mar del Plata, Buenos Aires

Congreso; LV Reunión Científica Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica , Reunión Científica Anual de la Sociedad Argentina de Fisiología y XLII Reunión Científica Anual de la Sociedad Argentina de Farmacología Experimental.; 2010

Sociedad Argentina de Investigación Clínica , Sociedad Argentina de Fisiología y Sociedad Argentina de Farmacología Experimental

La melatonina (MLT) es una hormona sintetizada por la glándula pineal. Diversas evidencias indican su acción antiproliferativa en células tumorales aunque aún no se ha descripto una vía de señales que explique este efecto. Nuestra hipótesis propone que la MLT induce apoptosis en células C6 involucrando la vía mitocondrial. En este estudio, hemos demostrado que la MLT (2mM) induce una disminución de la viabilidad celular (ensayo de MTT) a 24 y 48hs en presencia (18±1%,40±1%) y ausencia de suero (57±1%; 63±1%). Mediante microscopía de contraste de fase se observó una ruptura de la monocapa celular con retracción de los procesos astrocíticos a 24 y 48hs. La tinción con colorante de Hoechst 33258 mostró núcleos con alteraciones morfológicas consistentes con un proceso apoptótico (condensación y fragmentación de la cromatina a 1 y 2mM). Mediante espectrofotometría, se detectó un aumento en la actividad de caspasa 3 en presencia (81±23%, 200±32%) y ausencia de suero (208±40%, 89±29%) para 2mM MLT, a 24 y 48hs respectivamente. La preincubación con PD98059, inhibidor de la actividad de MEK, recuperó totalmente la viabilidad en ausencia de suero; sin embargo, en su presencia, PD98059 aumentó la muerte inducida por MLT. La expresión de proteínas de la vía mitocondrial indicó un aumento de Bax y una disminución de la proforma de Bid, de manera dosis dependiente; los niveles de Bcl-2 y Bcl-xl, mostraron concordancia con los resultados anteriores. El análisis morfológico mitocondrial mediante el reactivo MitoTracker Red CMXRos evidenció la presencia de mitocondrias normales (tubulares) en los controles y mitocondrias intermedias y fragmentadas en los tratamientos con MLT. Nuestros resultados sugieren que la MLT es capaz de inducir la vía apoptótica mitocondrial en células C6 de glioma, lo cual la señala como un posible adyuvante en nuevas estrategias terapéuticas.