Alteración de la dinámica mitocondrial en un modelo de Parkinsonismo inducido por manganeso

ALAIMO, A; GOROJOD R.; SAPIENZA C; KOTLER M.L.

Mar del Plata, Buenos Aires, Argentina

Congreso; LV Reunión Científica Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica , Reunión Científica Anual de la Sociedad Argentina de Fisiología y XLII Reunión Científica Anual de la Sociedad Argentina de Farmacología Experimental.; 2010

Sociedad Argentina de Investigación Clínica , Sociedad Argentina de Fisiología y Sociedad Argentina de Farmacología Experimental.

El Manganismo es un desorden neurológico que tiene su origen en la exposición crónica a Mn y presenta características clínicas y vías de señales similares al Parkinson Idiopático. Este metal se acumula en el SNC, particularmente en las mitocondrias de los astrocitos. Las mitocondrias son organelas dinámicas que se fusionan y fisionan constantemente. El balance de estos procesos está alterado en ciertas enfermedades neurodegenerativas y está regulado por OPA1, una GTPasa de fusión que promueve la formación de redes mitocondriales y cuyo clivaje induce fragmentación mitocondrial. Objetivo: Estudiar la implicancia de la vía mitocondrial en la apoptosis inducida por MnCl2 en células de astrocitoma C6. Resultados: Empleando MitoTracker Red y microscopía de fluorescencia se estableció una clasificación de morfologías mitocondriales: filamentosas, intermedias, y fragmentadas. El Mn induce disminución (62%, p<0.001) de mitocondrias filamentosas y aumento de las intermedias (93%, p<0.001) y fragmentadas (67%, p<0.001). Mediante W. Blot hemos demostrado que el Mn produce clivaje de OPA1. Además, dado que el Mn genera ROS (77±4%) e induce la apertura del poro de transición mitocondrial (PTP) con disipación del potencial de membrana, se estudió el efecto de la preincubación con CsA (inhibidor de PTP). La CsA incrementó un 80% (p<0.01) las mitocondrias filamentosas, disminuyó las intermedias (30%, p<0.05) y fragmentadas (55%, p<0.01) y previno el procesamiento de OPA1 en un 30% (p<0.05). El rol de OPA1 fue corroborado mediante sobreexpresión de OPA1 WT y Q297V (una mutante de ganancia de función). En ambos casos se observó disminución de la muerte celular (30% y 40%, p<0.001), del número de núcleos apoptóticos (20%, p<0.01), y de mitocondrias filamentosas (23%, p<0.01) y del clivaje de OPA1. Conclusión: el desbalance de los eventos de fusión y fisión participaría en el desencademiento del parkinsonismo inducido por Mn, donde OPA1 se comporta como una proteína antiapoptótica.