Efecto antitumoral de nanopartículas de hidroxiapatita en células de glioma

GOROJOD RM; ALAIMO A; GOROJOD RM; DITTLER ML; FACAL CL; GONZALEZ MC; KOTLER M.L

Ciudad Autonoma de Buenos Aires

Jornada; Jornadas Interdisciplinarias de Química Biológica; 2017

Departamento de Química Biológica, Facultad de Ciencias Exactas y Naturales, Universidad de Buenos Aires

La hidroxiapatita (HAp) [Ca10(PO4)6(OH)2] es un componente fundamental de lamatriz ósea inorgánica y ha sido ampliamente empleada para reconstrucción ósea.Las nanopartículas de HAp (NHAp) presentan propiedades emergentesinteresantes, y entre sus diversas ventajas, se ha propuesto que poseen un efectoantitumoral. En el presente trabajo evaluamos la citotoxicidad de las NHAp tantoen células normales como tumorales. Las células fueron expuestas a distintasconcentraciones de nanopartículas (50-500μg/ml) durante 24-72h y se evaluó laviabilidad por el ensayo de MTT. Si bien la exposición a la NHAp generó baja onula toxicidad en la mayor parte de los tipos celulares estudiados, en las célulasde C6 de glioma se observó un efecto citotóxico luego de 72hs de exposición(50μg/ml: 21±2%; 100μg/ml: 31±1%; 200μg/ml: 28±2%; 500μg/ml: 29±1%;p<0.001). Este hallazgo resultó relevante sobre todo teniendo en cuenta lasdificultades que presenta el tratamiento de tumores en el cerebro. Por este motivo,profundizamos en los mecanismos que subyacen al posible efecto antitumoral dela NHAp. La exposición a las nanopartículas indujo generación de especiesreactivas del oxígeno (ROS). Por tinción con Lysotracker Red DND-99, hallamosun incremento en el número y tamaño de los lisosomas. A nivel nuclear,detectamos un aumento en la fosforilación de la histona 2AX (γ-H2AX), lo queindica la ocurrencia de daño al ADN. No encontramos cambios en la morfologíanuclear por marcación con el colorante fluorescente Hoechst 33258 ni en losniveles protéicos de PARP ni p53. La exposición a la NHAp disminuyó lacapacidad proliferativa (ensayo clonogénico) y de migración celular (ensayo de laherida), ambos procesos relevantes para la progresión tumoral. La evidenciaobtenida apoya la existencia de un efecto antitumoral de la NHAp en células deglioma. Estos datos, en conjunto con ensayos in vivo, permitirán determinar lafactibilidad de emplear estas nanopartículas con fines terapéuticos.