Mecanismos moleculares implicados en la transducción de señales generada por manganeso en células gliales.

ALAIMO, A.; GOROJOD R.; SAPIENZA CARLA; KOTLER M.L.

Hotel 13 de julio, Mar del Plata, Buenos Aires, Argentina

Congreso; SAIC/SAI; 2009

SAIC/SAI

La exposición crónica al Manganeso (Mn) conduce a su acumulación y al establecimiento de un desorden denominado Manganismo, el cual se caracteriza por anormalidades neurológicas semejantes a las de la enfermedad de Parkinson. Las células gliales poseen un mecanismo de transporte de de alta afinidad para el Mn, el cual se acumula principalmente en sus mitocondrias. Objetivo: estudiar de las vías de señalización involucradas en la apoptosis de células C6 de glioma expuestas a MnCl2 (Mn2+). Resultados: Incubación con Mn 750µM generó citotoxicidad del 50% (p<0.001) y aumentó del 77% (p<0.001) en los niveles de ROS. Los antioxidantes NAC 10mM, Melatonina 0.5mM, GSH 1mM y ASA 1mM, restituyeron 17 (p<0.01), 35, 38 y 42 % (p<0,001) respectivamente la viabilidad versus Mn2+. Se dectaron aumentos en los niveles de proteínas de la Vía Extrínseca: FAS-L (67%, p<0.01) y Caspasa 8 (135%, p<0.001). El inhibidor de caspasa 8, Z-IETD-FMK (10μM) recuperó un 90% viabilidad celular. La Vía Intrínseca también tiene rol en la transducción de señales por Mn2+ dado que se detectó, mediante W.Blot, el clivaje completo de Bid (p<0.001) y aumento de p53 (p<0.001). Se analizó la morfología mitocondrial y el balance de sus eventos de fusión y fisión mediante MitoTracker Red, estableciéndose 3 categorías de células: con mitocondrias normales (tubulares), intermedias (tubulares con regiones globulares) y fragmentadas (globulares). Los resultados indicaron que el Mn2+ promueve la fisión mitocondrial, dada por la disminución (60%; p<0.01) de mitocondrias tubulares y por el aumento de las intermedias (96%; p<0.001) y fragmentadas (67%; p<0.01). OPA-1 promueve la formación de redes tubulares y su clivaje induce fragmentación mitocondrial. Análisis por W. Blot indicó que el Mn2+ produjo clivaje de OPA-1, y este disminuyó (90%) en presencia de Z-IETD-FMK. Conclusión: existe un link entre las vías apoptóticas, lo que sugiere que las células C6 se comportan como células tipo II en la señalización por Mn. Palabras Claves: Apoptosis, Manganeso, Glia