Evaluación de la toxicidad y vías de muerte inducidad por nanopartículas de silicio incorporadas a células Neuro-2a de neuroblastoma de ratón. Potencial aplicación en terapia radiante

MIGLIETTA E.A.; PORTE ALCON S; ALAIMO A.; GOROJOD R.; KOTLER M.L

Mar del Plata

Congreso; LVIII Reunión Científica Anual de la SAIC, Reunión Científica Anual de la SAFIS y XLV Reunión Científica Anual de la SAFE; 2013

SAIC SAFE SAFIS

El neuroblastoma es el tumor extracraneal sólido más frecuente en niños menores de cinco años y se caracteriza por una alta resistencia a la radioterapia convencional. Las nanopartículas de silicio (NPSi) han sido propuestas como posibles radiosensibilizadores por inducir la formación de ROS al ser irradiadas dentro de la célula tumoral. Objetivos: evaluar la toxicidad de NPSi derivatizadas con 2-propen-1-amina (NPSi-NH2, 1-3nm) en un modelo in vitrode neuroblastoma murino (Neuro-2a) y el tipo de muerte celular involucrada. Seleccionar las condiciones experimentales apropiadas para futuros experimentos implicando radiación ionizante. Resultados: La viabilidad celular medida por MTT y Rojo Neutro (RN) mostró una disminución del 59±4% (p<0,001) y 28±4% (p<0,001) respectivamente por exposición a 50μg/ml de NPSi-NH2 por 24hs. En cambio, 10μg/ml de NPSiNH2 por 24hs no causaron pérdida significativa de la viabilidad. La tinción nuclear con Hoechst 33258 mostró un aumento dosis dependiente en la frecuencia de aberraciones morfológicas tales como núcleos irregulares (200%) y lobulados (450%). La relación entre los niveles de Bax y Bcl-2 medidos por Western Blot así como la ausencia de morfologías apoptóticas clásicas (núcleos condensados y fragmentados y burbujeo de la membrana celular) sugieren que la muerte inducida por las NPSi-NH2 no sigue una vía apoptótica. El análisis de la morfología celular sugirió la ocurrencia de muerte por necroptosis. Sin embargo, la pre-incubación con el inhibidor de RIP1 quinasa, necrostatina-1, (25-100μM) no previno la pérdida de viabilidad celular (medida por MTT y RN) indicando que la necroptosis no está comprometida. Conclusiones: las NP-Si-NH2, que resultan aptas para la unión de moléculas proteicas  y  ?targeting? a tumores,  no presentan citotoxicidad a 10μg/ml, una concentración reportada como tóxica para la mayoría de las NP. Estudios futuros aportarán datos para la completa elucidación del tipo de muerte celular implicado