Nanogeles de quitosano encapsulantes de ácido fólico: un uso prometedor en aplicaciones oculares

BRUNO SG; RUBINSTEIN A; MORETTON MA; CHIAPPETTA D; ALAIMO A; PEREZ OE

CABA - Cero infinito FCEN UBA

Jornada; 5ta Jovenes Bionanocientificxs; 2023

IQUIBICEN, LELOIR, UNSAM, CNEA, CIBION

La degeneración macular relacionada con la edad (DMAE) es en parte el resultado de un foto-ataque oxidativo, por lo que los nutrientes con propiedades antioxidantes han sido explorados. De hecho, la suplementación de la dieta con las vitaminas C, E, B6, B9 (ácido fólico: AF) y B12, luteína, zeaxantina, y el zinc ha demostrado que retrasan la progresión de la degeneración macular atrófica, es decir, evita el avance hacia su forma más grave y/o formas neovasculares [1]. El AF es una forma sintética de folato ampliamente utilizada para la fortificación de alimentos. Sin embargo, su biodisponibilidad es limitada debido a su inestabilidad ante la luz, temperatura, pH, etc, por lo cual se justifica incluirlo en un sistema de encapsulación [2]. En el presente estudio, se empleó quitosano (QS) con grado de desacetilación del 91.6% (RMN) y peso molecular de 192 kDa. Se generaron nanogeles (NG) basadas en el entrecruzamiento de diferentes concentraciones de QS y tripolifosfato de sodio (TPP) para el entrampamiento del AF [3]. Las mismas fueron sometidas a su caracterización fisicoquímica, morfológica y topográfica. La solución coloidal optimizada presentó un tamaño de partícula de 142 ± 2 nm y un potencial ζ de +38 ± 1 mV. El estudio por espectrofotometría UV-visible reveló que efectivamente el AF se encapsuló, siendo el porcentaje de eficiencia de encapsulación (EE) del 58 ± 5%. Por su parte, los análisis de tamaños realizados a partir de imágenes de microscopía de transmisión electrónica (TEM) y empleando el software ImageJ, indicó que la mayor frecuencia de la población de partículas presentó un tamaño que osciló entre 10 - 15 nm. Por su parte, a través de la topografía obtenida por microscopía de fuerza atómica (AFM) y el empleo del software Nanoscope, se estimó que la altura de estas fue de 10 ± 1 nm. Asimismo, tanto las imágenes de TEM como AFM, demostraron que las NGs exhibieron una morfología de esferoide. La determinación de la capacidad antioxidante del AF libre y encapsulado se llevó a cabo mediante la técnica del poder antioxidante reductor del hierro (FRAP). Las células ARPE-19 del epitelio pigmentario de la retina humana (células blanco de la fase inicial de la DMAE) fueron expuestas a una curva dosis (10 - 1500µg/ml) respuesta de NGs. Las concentraciones ensayadas no mostraron citotoxicidad entre 10 y 500µg/ml de AF según el ensayo de MTT (24, 48 y 72hs). Se puede concluir que fue posible el exitoso de NP encapsulantes de AF que podrían usarse para la exploración de tratamientos oculares (ej. DMAE) a solas o en combinación con otros bioactivos con propiedades beneficiosas.