IV JORNADA DE INVESTIGACIÓN DE LA UNIVERSIDAD CAECE

LUCIA, ALEJANDRO; A. C. TOLOZA

Jornada; IV JORNADA DE INVESTIGACIÓN DE LA UNIVERSIDAD CAECE; 2018

Deacuerdo a los objetivos propuestos para el presente proyecto, hemos podido:?          Seleccionar aquellos componentesidentificados en aceites esenciales (AEs) de plantas autóctonas de diversasregiones de Argentina que en trabajos previos del laboratorio fueron efectivossobre piojos humanos. Loscomponentes con los que hemos trabajo fueron: Eugenol, 1,8-Cineol, Geraniol,Linalol, Carvacrol, terpineol, Citronelol, alcohol nonílico, Timol y Mentol. ?          Diseñar y desarrollar nanoemulsionesconteniendo monoterpenos y/o mezclas seleccionados anteriormente enconcentraciones inferiores a 5 %. Lapreparación de las emulsiónes basadas en polímeros tensioactivos fueronrealizadas utilizando viales de vidrio tubulares (Tamaño: 10 ml). Una cantidadde Pluronic® F127 fue disuelto en agua desionizada y destilada. Posteriormentese agitó con un agitador magnético durante 3 horas. El mismo fue preparado aconcentraciones diversas por encima de la concentración micelar crítica (CMC) ala temperatura estudiada en este trabajo (a 25ºC). Cada compuesto se incorporóen la solución Pluronic® F127 previamente realizada mediante agitación manual atemperaturas entre 20 ºC y 30 ºC a razón de concentraciones variables entre 1 y5 %. Con el fin de reducir los niveles de turbidez en las muestras, lasmuestran fueron diluidas en agua desionizada ultrapura para obtenernanoemulsiones transparentes capaces de ser mediadas mediante dispersión de luzdinámica. Las condiciones de pH y temperatura se controlaron para lograr elproceso de micelización. ?          Determinar la toxicidad de lasnanoemulsiones sobre adultos de piojos de la cabeza empleando diversas técnicasde exposición. Losinsectos, Pediculus humanus capitis,se recolectaron de cabezas de niños de 6-12 años de edad de colegios y hogaresde menores de Buenos Aires. Los mismos fueron colectados utilizando un peinefino, y se transportaron y acondicionaron a 18°C y 70% HR al CIPEIN (parareducir la deshidratación que sufre el insecto al apartarlo de sumicro-hábitat). En el laboratorio se seleccionaron piojos adultos y ninfas del3er estadio para usar en el ensayo biológico. Para poder llevar a cabo esto, setuvieron las autorizaciones correspondientes del ministerio de salud, educacióndel GCBA y de distintos municipios de la provincia de Buenos Aires.Metodologíade Inmersión In vitroAdultosy ninfas III. Se utilizó la metodología de inmersión in vitro directa durantetiempos variables entra 10 y 30 minutos de los insectos en el formuladopediculicida a estudiar. Luego, grupos de 10-15 piojos seleccionados sesumergieron por 5 minutos en los formulados a evaluar. Grupos de insectossumergidos en agua se utilizarán como controles negativos y grupos de insectossumergidos en la base del formulado se utilizaran como control basalexperimental de las formulaciones analizadas. El criterio de volteo ymortalidad utilizado será cuando un piojo se encuentra dado vuelta con laspatas hacia arriba y presentando (o no) ligeros movimientos de las mismas.Considerando que el producto a evaluar puede no poseer modo de acción rápido(volteo), los insectos tratados se mantendrán a 18  1 °C y 70- 80 % HR hasta18 horas para registrar mortalidad. Análisisestadístico. Todos los datos de mortalidad de adultos fueron corregidos con lamortalidad de los controles empleando la fórmula de Abbott. Se determinó elporcentaje de mortalidad y se hizo un análisis de la varianza (ANOVA). Lasmedias de los tratamientos se compararon y su separación se realizó mediante eltest de Duncan considerando un P<0,05. ResultadosobtenidosLospolímeros permitieron la dispersión de los AEs en agua debido a laencapsulación dentro del núcleo hidrofóbico de la micela copolimérica. De esteestudio, podemos destacar que fue posible obtener un sistema micelar complejoque contiene >90% agua, 1.25 % de diferentes monoterpenos y un 5% de unpolímero (polaxamer 407). Estas micelas poliméricas cargadas con moléculashidrofóbicas tienen un tamaño que varía desde 10-200 nm que fueron exitosamentesolubilizadas en un medio acuoso. Además, estas formulaciones demostraron serefectivas sobre los piojos de la cabeza con valores de mortalidad que variaronentre 40 y 60%, siendo las emulsiones más efectivas aquellas que conteníanlinalol, 1.8-cineol, terpineol, timol, eugenol, geraniol y alcohol nonílico. Discusión Las nanoemulsiones desarrollados y estudiadosen este proyecto demostraron ser efectivas sobre piojos de la cabezaresistentes a piretroides. Además, las formulaciones permanecieron estables pormás de 12 meses manteniendo la apariencia y estructura molecular originalmicroscópica (sin separación de fases o creaming). Los AEs son consideradoscomo compuestos seguros incluidos dentro de la categoría GRAS (en inglés,Generalmente Considerados Seguros) de la FDA (en inglés, Autoridad de Drogas yAlimentos) de Estados Unidos, y ubicados en la categoría IV de toxicidad agudadérmica e inhalatoria. Con lo mencionado, podemos afirmar el desarrollo de unanueva línea en la fabricación verde de formulaciones insecticidasbiocompatibles y biosustentables.