La sobreexpresión de una versión truncada de la proteína con bromodominio TcBDF3 afecta el crecimiento y la metaciclogénesis en Trypanosoma cruzi

ALONSO, VICTORIA LUCÍA; RITAGLIATI, CARLA; CRIBB, PAMELA; SERRA, ESTEBAN

Ciudad Autónoma de Buenos Aires (CABA)

Congreso; XXV Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Protozoología (SAP); 2012

Sociedad Argentina de Protozoología, Instituto Nacional de Parasitología "Dr. Mario Fatala Chaben"

La sobre expresión de una versión truncada la proteína con bromodominio TcBDF3 afecta el crecimiento y la metaciclogénesis en Trypanosoma cruzi El factor Bromodominio 3 de Trypanosoma cruzi (TcBDF3) es una proteína de de 224 aminoácidos con un peso molecular calculado de 24,7 kDa. Posee un bromodominio en su extremo N-terminal y una región rica en aminoácidos básicos y ácidos en el extremo C-terminal. El bromodominio, es un dominio proteico de unión a lisina acetilada y representa un módulo evolutivamente conservado presente casi exclusivamente en proteínas de localización nuclear. El extremo C-terminal no tiene homología con otros dominios conocidos pero podría estar interaccionando con otras proteínas ya que este tipo de secuencias de baja complejidad generalmente están involucradas en interacciones proteína-proteína. En trabajos previos, mediante inmunofluorescencia determinamos que TcBDF3 en amastigotes y epimastigotes se localiza en todo el cuerpo celular del parásito observándose más intensamente marcada la región del bolsillo flagelar. En tripomastigotes la localización cambia totalmente y observamos a TcBDF3 solo en el flagelo. Además, demostramos que esta proteína esta interaccionando con tubulina α acetilada presente en el citoesqueleto y flagelo de T. cruzi. En este trabajo se sobre expresó TcBDF3 entera y una versión truncada (que solo presenta el bromodominio) fusionadas a la proteína fluorescente cian (CFP). Con los parásitos transfectantes se realizaron curvas de crecimiento, se detectó la proteína fluorescente por microscopía confocal en epimastigotes y tripomastigotes y se cuantificó su capacidad de realizar metaciclogésis espontáneamente e inducida por estrés nutricional en medios específicos. Observamos que TcBDF3ΔC presentan una tasa de crecimiento menor que los controles, su capacidad de realizar metaciclogésesis también se ve disminuida en las condiciones ensayadas y en tripomastigotes se detectó una deslocalización de la proteína truncada. Todos estos resultados nos llevan a pensar que TcBDF3 podría tener una participación activa en el proceso de metaciclogénesis en T. cruzi.