p21 como mediador de los efectos del REbeta en adenohipofisis

PEREZ, PABLO; SABATINO MARIA EUGENIA; PETITI JUAN PABO; WAGNER IGNACIO; DE PAUL ANA LUCIA; TORRES ALICIA; GUTIERREZ SILVINA

Cordoba

Jornada; XVI Jornadas de Investigacion Cientifica JIC, Facultad de Ciencias Medicas,CM, UNC; 2015

Secretaria de Ciencia y Tecnologia. Facultad de Medicina, UNC.

El estradiol (E2) actua a traves de sus receptores estrogenicos (RE) alfa y beta, presentes en adenohipofisis. Se ha demostrado que el REá modula la expresion de p21, un regulador crucial del ciclo celular. Esta proteina ejerce efectos diferenciales dependientes de su localizacion subcelular, en citoplasma promueve la proliferacion mientras que en nucleo causa arresto del ciclo celular. Resultados previos de nuestro grupo han demostrado que el REâ inhibe la proliferacion celular adenohipofisaria, desconociendose los mecanismos moleculares involucrados. Considerando estos antecedentes nos propusimos dilucidar si p21 esta involucrado en los efectos del estradiol mediados por el REâ sobre las celulas adenohipofisarias. Cultivos primarios de celulas adenohipofisarias de ratas Wistar hembras (n=5) fueron estimulados por 72h con E2 o con agonistas especificos del REa (PPT) y del REb (DPN) y procesados para la determinacion de la expresion de p21 en fraccion nuclear y citoplasmatica por Western blot (WB) y la localizacion subcelular por inmunofluorescencia (IF). Se realizaron ensayos de inmunoprecipitacion (IP) y doble inmunocitoquimica ultraestructural de REb y p21 por microcopia electronica de transmision (MET). Todos los ensayos se realizaron 3 veces de manera independiente y los resultados fueron analizados estadisticamente (test ANOVA-Tuckey, p