Efecto regulatorio del estradiol sobre la palmitoilación del REa y la proliferación de células adenohipofisarias normales y tumorales.

SOSA LILIANA; VACA ALICIA MALDRE; PICECH FLORENCIA; GUIDO CAROLINA; NICOLA JUAN PABLO; PETITI JUAN PABLO; DE PAUL ANA LUCIA; GUTIÉRREZ SILVINA; TORRES ALICIA

Mar del Plata

Congreso; LX Reunión de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica (SAIC) Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Fisiología (SAFIS); 2015

SAIC-SAFIS

En trabajos previos hemos demostrado la palmitoilación del REα en células adenohipofisarias normales y tumorales. La regulación de esta modificación postraduccional del REa mediada por estradiol (E2) podría modificar la movilización del pool de RE intracelulares a la membrana plasmática. El objetivo fue determinar si E2 es capaz de modular la expresión de las palmitoilasas DHHC-7 y DHHC-21 y la actividad proliferativa de células adenohipofisarias normales y tumorales. Cultivos primarios adenohipofisarios de ratas Wistar hembra y de la línea GH3 fueron tratados con E2 (10nM) por 30 min. La expresión de REα de membrana (REam) fue evaluada por biotinilación de proteínas de membrana y la asociación del REam y caveolina-1(cav-1) por inmunoprecipitación. La proliferación celular fue analizada luego de 24h de incorporación de BrdU por inmunocitoquímica. La expresión del REa, cav-1 y ERK total y fosforilada fue analizada por WB. La participación de las palmitoilasas fue evaluada utilizando el inhibidor, 2bromo palmitato (2BP, 10 uM). Los niveles de ARNm de DHHC-7 y DHHC-21 se determinaron por qPCR luego de 3, 6, 9 h de estímulo con E2. Estadística: Test-t. La inhibición de la palmitoilación del REα indujo pérdida de su localización en membrana e inhibición de la asociación de REa y cav-1 en cultivos primarios y GH3. En ambos tipos celulares, los niveles de ARNm de DHHC-7 y DHHC-21 disminuyeron luego de 3h de incubación con E2, alcanzando niveles similares al control luego de 6h de estímulo. En cultivos primarios, E2 no produjo cambios en la actividad mitogénica, observándose la inhibición de la fosforilación de ERK1/2 con 2BP. Sin embargo, E2 aumentó la proliferación de células GH3 en forma coincidente con la fosforilación de ERK1/2, efectos que fueron inhibidos por 2BP. En resumen, el E2 podría modular las palmitoilasas DHHC-7 y DHHC-21 regulando así, la expresión del REa de membrana y finalmente la proliferación de células adenohipofisarias