Efectos del REbeta sobre reguladores del ciclo en celulas adenohipofisarias normales y tumorales

PEREZ, PABLO; PETITI JUAN PABLO; SABATINO MARIA EUGENIA; DE PAUL ANA LUCIA; TORRES ALICIA; GUTIERREZ SILVINA

Mar del Plata

Congreso; LVIII Reunion Anual de la Sociedad Argentina de Investigacion Clinica; 2013

Sociedad Argentina de Investigacion Clinica

En estudios previos mostramos disminucion en la expresion del receptor estrogenico beta (REb) durante el desarrollo de una lesion hiperplasica/adenomatosa hipofisaria. En continuacion, para investigar la implicancia del REb en el control proliferativo adenohipofisario, analizamos la expresion de reguladores del ciclo celular en celulas normales y tumorales. Se utilizaron cultivos primarios adenohipofisarios de rata Wistar estimulados con 17b-estradiol (E2) o con el agonista del REb (DPN) por 72h y gl¨¢ndulas hiperplasicas/adenomatosas generadas con benzoato de estradiol por 20, 40 y 60d. Se inmunomarcaron los REayb por microscopia confocal (MC) y electronica (ME) y se cuantifico su expresion por citometria de flujo. Se determino la expresion de ciclina D1, CDK4, p21 y del supresor tumoral PTEN por western blot y se localizaron mediante ME y MC. Se determino la progresion del ciclo celular con ioduro de propidio. Analisis estadistico ANOVA-Tuckey. En el modelo hiperplasico adenomatoso se observo una disminucion gradual en la expresion de REb y PTEN, mientras que los niveles de ciclina D1, CDK4 y p21 citoplasm¨¢tico incrementaron en correlacion con el aumento del numero de celulas en fase S/G2M, sugiriendo que el REb1 podria estar involucrado en la regulacion del ciclo celular. En el cultivo primario, E2 aumento la expresion de las proteinas mencionadas anteriormente, mientras que DPN inhibio PTEN y p21, sin modificar ciclina D1 y CDK4. Adem¨¢s, mediante MC se observo localizacion principalmente citoplasma¢tica de p21 en celulas tumorales y normales controles y tratadas con E2, siendo solo el estimulo con DPN capaz de incrementar su expresion nuclear. Estos resultados sugieren que el REb ejerceria un posible rol inhibidor del ciclo celular mediado por p21. La activacion del REb por su agonista especifico induce una expresion proteica diferencial de los reguladores del ciclo celular analizados, comparada con la mediada por ambos subtipos de RE (a/b) estimulados por E2.