GLUTAMINA ¿UN AMINOÁCIDO PROTECTOR DE LA ABSORCIÓN INTESTINAL DE CALCIO?

DÍAZ DE BARBOZA G.; BENEDETTO M.; PÉREZ A; TOLOSA DE TALAMONI N

Jornada; Jornada Científica de SEMCO; 2013

Glutamina (GLN) es un aminoácido con propiedades restauradoras del estado redox y protectoras de la muerte celular en diferentes tejidos expuestos a drogas pro-oxidantes. Dado que en nuestro laboratorio se demostró que la administración de vitamina K3 o menadiona (MEN) produce disminución en la absorción intestinal de calcio mediante estrés oxidativo y apoptosis de células epiteliales duodenales, nos propusimos como objetivo estudiar el posible rol protector de GLN en relación con el efecto inhibitorio causado por MEN sobre la absorción intestinal del catión. Para ello, a pollos Cobb-Harding (Gallus domesticus) de 4 semanas de edad alimentados con una dieta comercial (Cargill, SACI, Córdoba), se les suministró por vía gastrointestinal 1g de GLN / Kg de peso corporal y por vía intraperitoneal 2,5 μmol de MEN /Kg de peso corporal (60 ó 90 min. después). Se permitió la acción conjunta de ambas drogas por 30 min. Los animales controles se trataron con vehículo. La absorción de calcio se determinó con la técnica del asa intestinal ligada in situ empleando Ca45 como trazador. En homogeneizados de mucosa duodenal se cuantificó el contenido de glutatión  intracelular (GSH) y la actividad de las enzimas antioxidantes catalasa (CAT) y superóxido dismutasa (SOD) por  métodos espectrofotométricos. La muerte celular por apoptosis se evaluó mediante el análisis de la fragmentación del ADN  por TUNEL y la expresión de proteínas pro y anti-apoptóticas mediante técnicas inmunohistoquímicas. Los resultados mostraron que la administración de GLN 60 ó 90 min previos a la inyección de MEN previno la disminución de la absorción intestinal de Ca desencadenada por MEN. Además, GLN mantuvo el contenido de GSH intracelular y las actividades de las enzimas SOD y CAT en valores similares a los de los controles. GLN evitó el incremento del 30% en el índice apoptótico producido por MEN. La evaluación de las proteínas pro-apoptóticas reveló que GLN bloquea el incremento inducido por MEN de citcocromo c, Fas y FasL en enterocitos. La inmunotinción de Bax no se modificó con ninguno de los tratamientos. La expresión de proteínas anti-apoptóticas Bcl2 y calbindina D28K disminuyó tras el tratamiento con MEN. La administración previa de GLN sólo impidió la disminución de BCL2 desencadenada por la quinona. En conclusión, GLN protege a los enterocitos del estrés oxidativo desencadenado por MEN mediante preservación de las defensas antioxidantes celulares, bloqueo de las vías apoptóticas intrínseca y extrínseca y mantenimiento de la expresión proteica de la molécula antiapoptótica Bcl2. GLN ejercería así protección de la absorción intestinal de Ca, mediante mantenimiento del número de enterocitos con capacidad absortiva del catión.